IN-FUSION技术通过发现INFUSION酶，解决了上述问题。INFUSION酶能够识别线性化的DNA片段，形成粘性末端，使得目标质粒和载体在互补的粘性末端之间快速连接，无需酶切位点的限制，大大提高了连接效率和构建周期。与传统酶切连接技术相比，IN-FUSION技术连接效率高，构建周期短，尤其适用于3000bp以上的基因载体...
IN-FUSION技术主要来源于INFUSION酶的发现,(如图)INFUSION酶能够识别线性化的DNA片段5’-3’末端任意16碱基,使其形成粘性末端。目标质粒通过酶切或者PCR线性化后,也能被INFUSION酶识别。只需要载体和基因形成的粘性末端互补,通过退火的过程就能完成载体的构建。IN-FUSION技术相比于传统酶切连接技术优点在于:1、摆脱了...
是。In-Fusion技术是Clontech公司开发的一种DNA片段连接方法，它允许在两个DNA片段之间形成平末端连接。
1.2 方法1.2.1 基于In-fusion连接PCR扩增引物设计 In-fusion引物的5′端和待连接片段端有15bp的同源序列,引物3′端是靶基因特异序列。根据引物设计的一般原则和In-fusion引物15bp同源序列的添加原理[12-13](图1),PCR扩增片段通过15bp的同源序列插入线性化的载体,同源序列是通过PCR扩增引物添加。线性化载体的5′...
in_fusion连接技术(描述引物设计原理) DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.05.001 动物医学进展, ,():7 014355 2 1 - P M roressinVeterinaredicine g y 檲 殘檲檲檲檲殘 研究论文 殘 殘 檲 檲檲檲檲 If 连接技术优化及其在大片段重组载体构建中的应用 nusion - * , , , , , 李玲玲 张 伟 宋...
clontech的in-fusion无缝连接产品中文操作手册新.pdf,® In-Fusion HD Cloning Kit 操作手册 United States/Canada 800.662.2566 Asia Pacific +1.650.919.7300 Europe +33.(0)1.3904.6880 Japan PT5162-1 (072012) +81.(0)77.543.6116 Cat. Nos. Many Clontech Laborator
In Fusion反应的成功是至关重要的 In Fusion可以同时连接2个或者多个片段 例如载体和插入片段 或者多重片段 只要其末端具备15个同源碱基就可实现 因此 In Fusion PCR引物 必须以获得的PCR产物包含与载体同源的末端的原则进行设计 Figure 2是引物设计概要 Figure 3是In Fusion PCR引物设计实例演示 设计In Fusion PCR...
有谁用过In-Fusion技术做连接的？15k的大载体和1k的目的片段做连接，连接效率怎么样？？
同源区段长度对In-Fusion 连接效率的影响 李慧仙,朱平 技术 技术(Clontech) [7] 等。Gateway技术是基于λ噬 菌体位点特异重组系统,由BP和LR两个反应 构成,两个反应的阳性重组率均可高达90%以上, 但会引入多余序列。该技术需要特殊含attR位点 表达载体,Invitrogen公司提供一系列常用attR位 点修饰后的表达载体,此外...
运用 In-Fusion 技术将 PCR 扩增片段定向克隆至表达载体 pPIC3.5K 中.结果对于长度大约为2.4 kb 的较大片段 DNA 的克隆, PCR 扩增片段的末端与载体间最适同源区段长度约为100 bp,此时连接效率最高,其阳性重组率高达90%左右,是常规酶切连接法的3倍.与后者相比,该技术将克隆周期由3~4 d...