免疫组化标记时细胞阳性着色程度取决于抗原含量、分布密度和标记方法及其敏感性。 一般而言,抗原含量越多,分布密度越高,阳性结果显色则越强。根据阳性标记的显色程度分为:蓝色,阴性;淡黄色,弱阳性;棕黄色,中等阳性;深棕色,强阳性。 免疫组化原理图 免疫组化分析主要有两种方法,阳性着色细胞计数法和染色强度评分法...
免疫荧光染色是研究特异蛋白抗原在细胞内分布的一种常用实验技术,通过荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下对抗原进行细胞定位。 但免疫荧光的照片不仅仅可以做形态学分析,还能通过检测平均荧光强度,对特异性蛋白表达进行半定量分析。 在进行平均荧光强度检测之前,首先要清楚平均荧光强度的定义。 对于一张单通道(单色)的荧光...
合格的组化图在图中的空白区域中,灰度值理论上应为255。 免疫组化的分析结果是图片的光密度值(Optical density)即OD值,被测物质的量越多,OD值越高,透射出的光越少,反映在照片上就越黑。免疫组化DAB染色越深,OD值就越大,蛋白表达量越多。因此就需要把灰度值...
免疫荧光染色如何分析?!科研人怎么能不会用image J和prism 呢! 2457 0 01:11 App 手把手教你 ImageJ细胞计数 3.1万 6 08:44:35 App image j (fiji)全系列教程,96个技能汇总 2.2万 3 09:34 App 『超简单』ImageJ图像处理 - 荧光强度分析 3414 1 11:29 App 如何使用image j 来定量荧光强度——ROS...
免疫组化分析主要采用两种方法：阳性着色细胞计数法和染色强度评分法。前者在光学显微镜下随机多个视野下计数阳性着色细胞；后者则根据染色强度和染色阳性范围评分，最终分数相加。然而，组织样品的病理学分析仍然耗时且具有主观性，人工判断染色强度来评分容易受视觉偏差影响。阳性细胞计数往往无法自动化进行，导致...
免疫荧光的荧光量化以及共定位分析。 有不少同学提到了免疫荧光共定位分析的问题,这期主要讲了荧光共定位分析(在4:30以后)。 欢迎将视频分享给有需要的同学,希望能够有所帮助。 也欢迎大家评论、弹幕讨论,有问题一起交流。 知识 校园学习 必剪创作 学习 ...
探索ImageJ的荧光定量魔法：平均荧光强度检测详解 在生物学研究中，免疫荧光染色是揭示细胞内特异性蛋白分布的黄金工具。然而，通过ImageJ这一强大的图像分析软件，我们不仅可以进行形态学观察，还能对蛋白表达进行精细的半定量分析，关键就在于平均荧光强度的测量。定义篇 一张单通道的荧光图像，每个像素的灰度...
自动白平衡功能是相机根据照片总体色彩情况自动对每张照片进行各自不同的白平衡校正。这会严重影响分析测量的准确性。显微镜照片用一两种染料染色,照片的色彩就应该是不平衡的,不能校正。由于免疫组化照片上黄色染色多,自动白平衡会将图片色调向蓝色调整,导致...
ImageJ是定量免疫组化分析的有效软件。为了使用ImageJ评估免疫组化载玻片，将图像捕获到工作站计算机的硬盘驱动器上。此后，在NIH Image/ImageJ中打开捕获的图像，用于评估免疫组化载玻片上的阳性指数以及荧光图像。如果研究人员希望计算染色或发荧光的细胞图谱，可以通过点击鼠标将不同颜色的标记放在正核和负核上，直接...
在研究特异蛋白抗原细胞内分布的免疫荧光染色中，ImageJ工具不仅可以用于形态学分析，还能进行平均荧光强度的半定量评估。平均荧光强度的计算基于单通道荧光图片，其定义为特定区域内的荧光强度总和除以该区域面积。首先，打开图像并分离单通道，对于RGB格式，可能需要先进行通道分割。选择合适的阈值以区分信号和...