1 年前· 来自专栏 ImageJ实用教程 Treasure琛关注免疫荧光染色是研究特异蛋白抗原在细胞内分布的一种常用实验技术,通过荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下对抗原进行细胞定位。 但免疫荧光的照片不仅仅可以做形态学分析,还能通过检测平均荧光强度,对特异性蛋白表达进行半定量分析。 在进行平均荧光强度检测之前,首先要清楚...
1. 首先，确保你已经掌握了细胞核的分割和计数方法。从一张自动计数的图像开始，如：文件打开 -> 8-bit转换 -> 调整阈值分离细胞核 -> 填补空隙 -> 清理重叠部分。2. 宏代码的最后一步，选择 "Analyze" -> "Analyze Particles"，勾选 "Add to Manager"，这样每个细胞的位置就被记录在ROI Mana...
步骤1：细胞分割与ROI Manager应用1. 从上篇教程中，学习细胞计数的方法，分割出细胞核并使用ROI Manager管理选区。2. 将每个细胞的轮廓添加到ROI Manager，便于后续测量。步骤2：简单快捷的测量方法更新后的建议是，在Set Measurements时，选择Redirect to原始图像，这样在Analyze Particles时，测量将基于原...
点击Measure，你将得到Mean，即平均荧光强度，等于IntDen（荧光强度总和）除以Area。这项数据可用于Excel或csv文件导出，但需注意，免疫荧光的半定量分析受到人为因素和非特异性结合的限制，因此需要遵循固定标准和流程以减小误差。
定义篇 一张单通道的荧光图像，每个像素的灰度值正是其荧光强度的体现。计算特定区域的平均荧光强度，公式如下：Mean (平均荧光强度) = Integrated Density (荧光强度总和) / Area (区域面积)理解了这个基本概念后，ImageJ为我们提供了精细的操作步骤来实现这一过程。实例演示 让我们通过一个激光共聚焦...
这样在Analyze Particles的时候,就只会根据ROI去测原图的荧光强度,而不是二值化后的图。 一、细胞自动计数 还是以自动计数的那种图为例: 1、打开该图像(File -> Open,或者将图片直接拖动到菜单栏) 2、将图像转为8-bit(Image -> Type -> 8-bit) ...