用纯化的人白介素10(IL-10)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入人白介素10(IL-10),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白介素10(IL-10)呈正...
3. 加入检测抗体：接着加入生物素标记的抗 IL-10 检测抗体。这种检测抗体也能够特异性地识别 IL-10，并且与已经结合在捕获抗体上的 IL-10 分子结合，形成 “捕获抗体 - IL-10 - 检测抗体” 的三明治结构1。4. 结合链霉亲和素 - HRP：加入链霉亲和素与辣根过氧化物酶（HRP）的结合物。链霉亲和素能够与生...
1. 灵敏度:最小的IL-10检测浓度小于5pg/ml。稀释度的线性:将含有1000pg/ml IL-10的人血清用标准稀释缓冲液系列稀释。样本线性回归与预期浓度相关系数为0.99。 2. 特异性:不与人其他细胞因子反应。与猿的IL-10发生交叉反应;滤过性毒素的IL-10无干扰。 3. 重复性:板内、板间变异系数均〈10%。 4. 本实验...
IL-10显示可以抑制巨噬细胞的细胞毒活性,刺激B细胞、肥大细胞和胸腺T的的增生和分化。IL-10由多种细胞合成。人IL-10的前体有178个氨基酸,成熟蛋白有160个氨基酸。本试剂盒所用标准品为重组的人IL-10,有160个氨基酸,分子量为18.6KDa。检测指标:Interleukin-10;IL-10;IL10;cytokine synthesis inhibitory factor;...
用CD19、IL-10检测小鼠脾脏的Breg,IL-10需要刺激才能检测吗 首先,需要明确的是,得刺激。 其次,我们结合相关资料,简单看一下分离B细胞、刺激的方法: •从小鼠获得的脾脏组织中分离 B 淋巴细胞。使用CD19 MicroBeads纯化总脾脏 B 细胞 (CD19 +),并使用含有C...
采集方法:用预冷的 PBS 冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。加入适量的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比,并可根据实验需要适当调整),在玻璃匀浆器中在冰上充分研磨组织,还可进行超声破碎或反复冻融,最后将匀浆液以 5000×g 离心 5 - 10 分钟,取上清检测。
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL。4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用...
(一)ELISA试验用IL-10McAb包被反应板,以生物素结合的第二抗体进行夹心法ELISA检测IL-10活性或含量。(二)生物活性测定法可根据IL-10对抗原刺激THl细胞产生IFN-7的抑制作用测定其活性。若不能维持培养Tul细胞,可用PHA刺激的脾细胞代替。1.向96孔培养板每孔加50/zLRPMI-1640和50ul待测标本,并设置IL-10标准品(...
白介素试剂标准品说明书标本检测方法 人IL-10定量分析酶联免疫检测试剂盒IL-10简介:人IL-10是由160个氨基酸组成4个α螺旋结构的的细胞因子,分子量为18.5kDa。在水溶液中以二聚体形式存在,分子量约为39kDa。人IL-10是个多效性的因子,能够对多种细胞起作用,主要表现为免疫抑制和免疫刺激两方面的作用,特别是在...