组织匀浆:用预冷 PBS (0.01M,pH = 7.4) 冲洗组织,去残留血液后剪碎,按 1 : 9(可调整)重量体积比与含蛋白酶抑制剂的 PBS 加入玻璃匀浆器,在冰上研磨,可超声破碎或反复冻融匀浆液,最后以 5000prm 转速离心 5 - 10 分钟取上清检测。 细胞提取液:贴壁细胞用冷 PBS 清洗后胰蛋白酶消化,2000prm 转速离心 ...
用纯化的小鼠白细胞介素10(IL-10)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠白细胞介素10(IL-10),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白细胞介素...
•常见刺激方法:- PMA、离子霉素和脂多糖(LPS)的组合,一般刺激4小时[3]。- B细胞受体(BCR)刺激:抗IgM抗体可用于通过BCR信号刺激IL-10的产生[2]。对新生小鼠CD19+CD43-B细胞特别有效。- Toll样受体(TLR)激动剂:通常使用激活TLR4的LPS[5]。- CD40配体:...
1.血清IL-10水平检测:通过采集患者的血液样本,利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)等技术检测血清中的IL-10水平。高血清IL-10水平可能与肿瘤的存在和进展相关。然而,需要注意的是,IL-10水平的升高也可能与其他疾病,如慢性炎症和自身免疫性疾病等相关。 2.组织中IL-10的表达:通过手术获得...
IL-10显示可以抑制巨噬细胞的细胞毒活性,刺激B细胞、肥大细胞和胸腺T的的增生和分化。IL-10由多种细胞合成。人IL-10的前体有178个氨基酸,成熟蛋白有160个氨基酸。本试剂盒所用标准品为重组的人IL-10,有160个氨基酸,分子量为18.6KDa。检测指标:Interleukin-10;IL-10;IL10;cytokine synthesis inhibitory factor;...
1、细胞培养上清液:1000xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。 2、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热源和内毒素的试管。收集血液后,1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 3、血浆:EDTA,柠檬酸盐和肝素血浆可用于检测。1000xg离心30分钟去除颗粒。
2. 加入样本和标准品：将待测样本（如血清、血浆、细胞培养上清等）加入到微孔板中，同时设置不同浓度的 IL-10 标准品。如果样本中含有 IL-10，它就会与微孔板上预先包被的捕获抗体结合3。3. 加入检测抗体：接着加入生物素标记的抗 IL-10 检测抗体。这种检测抗体也能够特异性地识别 IL-10，并且与已经结合在...
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL。4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用...
检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-10 的浓度。IL-10 捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-10 会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-10 抗体后，抗人IL-10 抗体与IL-10 接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过...