抗体被固定在固相基质(如磁珠/琼脂糖小球)上,从而从复杂溶液中捕获抗原。 IP的抗体最好使用纯化的天然蛋白制作的抗体来做,也可以用纯化的重组蛋白的抗体。最好不要用人工合成多肽制作的抗体,因为这种抗体识别的位点可能被深深地藏在了蛋白的内心深处。CHIP和IP没有太大的区别,唯一的问题在于,如果抗体识别的表位和该...
一般而言,抗体研发出来之后都要经过WB,IP,IF,IHC实验。档发现浓度不够做IF,IHC时候,国外的抗体一般都是写未检测,国内的抗体一般是不写。所以尽量不要抱着试试的心里去尝试,往往只会浪费时间。你想啊,如果抗体能够做该实验,他们肯定会写上去啊。 6)做ELISA的抗体能否用来做WB? 通常用WB抗体稀释浓度为1:1000,...
IP/CHIP:免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗原抗体特异性反应纯化富集样品中目的蛋白的一种方法。通常使目标蛋白同对应抗体-protein A/G形成免疫复合物沉淀而得以收集。根据不同种类的检测目标,可以将IP技术分为:CHIP、RIP、Co-lP。IP富集蛋白,检测与其结合的DNA的方法即为ChIP;检测与其结合的RNA的方法即为RIP;...
但不是说ELISA的抗体不能用于做WB,抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:1000,那么你可以试试1:100做做WB。 如果有关于抗体选择的任何问题或者是WB、IHC、ICC、FC、IP、流式实验问题,可以进我们的实验互助群求助,每个实验都有对应的交流群~ 宝子们,生科人实验互帮互助微信群建好了!wb、流式细胞术、PCR、免疫组化...
通常WB/FC抗体稀释浓度为1:1000,IP/IF/IHC为1:100,而如果可以做ELISA则可以稀释1:10000。如果一个抗体用来做ELISA的,那么言外之意就是该抗体效价不高。但不是说ELISA的抗体不能用于做WB,抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:...
但也有特殊情况,例如图一中Rb(4H1)Mouse mAb(9309),此抗体为单克隆抗体,但是经过实验验证,发现其居然适用WB、IP、IHC、IF、F、CHIP等所有实验。推测此抗体的抗原只含有线性抗原表位,并且抗原表位暴露在蛋白质表面,没有包裹在蛋白内部而无法识别,那这个抗体就有可能适用上述提到所有方法学实验,在适用范围验证过程中...
IP:免疫沉淀 IF:免疫荧光 ICC:细胞免疫化学 IHC:免疫组化- IHC-P-免疫组化-石蜡切片 IHC-F-免疫组化-冰冻切片
CHIP是利用IP技术富集蛋白后检测与其结合的DNA的量；RIP是检测与其结合的RNA的量；Co-IP则是检测与其结合的蛋白质的量。免疫沉淀是用抗体去识别结合自然状态下的蛋白质，因此做IP实验时抗体最好选择由天然蛋白作为抗原制备出来的抗体，当然也可以选择由重组蛋白作为抗原制备的抗体，注意最好不要选择由人工合成多肽作为...
WB、IP、IHC、..WB:蛋白质印迹是生命科学实验中一项常见的分子生物学实验技术,原理为利用电泳(SDS-PAGE)分离蛋白质,接着将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法,通过分析条带大小和显色信号获得目标蛋白质
通常WB/FC抗体稀释浓度为1:1000,IP/IF/IHC为1:100,而如果可以做ELISA则可以稀释1:10000。如果一个抗体用来做ELISA的,那么言外之意就是该抗体效价不高。但不是说ELISA的抗体不能用于做WB,抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:10000,那么你可以试试1:1000做WB。