本发明属于基因工程技术领域,具体而言,涉及一种构建Igf2bp1基因敲除小鼠胚胎干细胞系的方法,具体是通过Igf2bp1DNA的第一个外显子设计sgRNA序列,合成并将寡核苷酸链1和寡核苷酸链2退火得到双链DNA.将DNA片段克隆至LentiCRISPR v2载体中,构建LentiCRISPRbp1重组质粒.将重组质粒转染293T细胞,收集慢病毒;取病毒上清感染...
15、第三方面,本发明提供了一种构建igf2bp1基因敲除小鼠胚胎干细胞系的方法,为采用有限稀释法对第二方面所得的敲除igf2bp1基因的小鼠胚胎干细胞进行传代筛选,获得稳定敲除igf2bp1基因的小鼠胚胎干细胞系。 16、第四方面,本发明提供了一种igf2bp1基因缺失的小鼠胚胎干细胞株,为如采用第三方面所述的构建igf2bp1基因...