间接免疫荧光需要使用二抗。室温避光孵育1h.PBST漂洗3次,每次冲洗5min后,再用蒸馏水漂洗一次。 (7) 封片及检测。滴加封片剂一滴,封片,荧光显微镜检查。 (一)细胞准备 用于免疫荧光实验的细胞可以是直接生长在盖玻片上的贴壁细胞,也可以是经过离心后涂片的悬浮细胞或者是将取自体内的组织细胞悬液离心后涂片。贴壁良...
1. 第一封闭步骤:室温下,用第一封闭液(来源于产生二抗的物种的 10% 血清)孵育细胞 30 分钟。 2. 室温下,用第一种一抗(溶于 1% BSA 或 1% 血清的PBST 中)在湿盒中孵 育细胞1 小时,或4 ℃ 过夜孵育(一抗溶于 1% 明胶或 1% BSA 的PBST 中)。 3. 倒出第一种一抗溶液,用PBS 洗涤细胞3 次,每...
5. 吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4 ℃孵育过夜。6. 加荧光二抗： PBST 浸洗爬片3次，每次3 min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中37℃孵育1 h，PBST浸洗爬片3次，每次3 min。注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进...
✅实验步骤免疫荧光主要实验步骤包括了细胞固定、细胞通透、封闭、一抗、二抗和封片。Tip:实验前铺细胞时要加细胞爬片,吸取和加入液体的时候贴壁加入不要直接打在细胞上,注意一抗和二抗的来源要对应~封片和共聚焦显微镜拍摄在其他笔记里有视频教程哦~✅图片处理ppt或者ps都可以进行图片处理,我一般用ps进行拼图。图片...
免疫荧光免疫荧光实验免疫荧光染色生物实验科研试剂 写下你的评论... 暂无评论相关推荐 10:17 传奇黑客被判175年,只因自己撕烂了美国伪善的面具 星辰趣味屋 · 2000 次播放 2:00 打隧道遇到了一个巨大溶洞,该怎么处理? #基建狂魔 #隧道 元元· 1996 次播放 6:16 绝境中的生存游戏,每一步都是死亡边缘《极限...
免疫荧光技术的实验步骤包括细胞准备、固定和通透处理、抗体孵育、荧光检测等。在实验过程中,需要注意以下几点: 抗体选择:选择与目标蛋白高度特异性结合的抗体,并确保一抗和二抗的种属匹配,避免交叉反应。 荧光染料选择:根据实验要求选择合适的荧光染料,考虑其激发和发射波长,以确保荧光信号可以被检测设备有效捕捉。
免疫荧光(IF)实验操作步骤及详细说明 一、试剂和溶液 10X PBS:80g NaCl,2g KCl, 14.4g Na2HPO4和2.4g KH2PO4加1L纯水,调pH至7.4洗涤液:1× PBS:纯水稀释10X PBS;1× PBST:含0.05% Tween-20的1×PBS固定液:4%多聚甲醛:4g多聚甲醛溶于100ml PBS通透液:0.1% triton-100封闭液:PBS配制的3% BSA抗体...
组织免疫荧光(IF)是一种使用荧光标记的抗体来检测组织切片中特定蛋白的存在和定位的技术。这种方法在细胞生物学、分子生物学和病理诊断中广泛应用。 实验步骤 步骤一:组织切片准备 将组织样本进行石蜡包埋,切成4-5微米厚的切片,贴在处理过的载玻片上。
一、免疫荧光原理简介 免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育及荧光检测等。细胞片制备(通俗的说法是细胞爬片)是免疫荧光实验的第一步,细胞片的质量对实验的成败至关重要,原因很简单,如果发生细胞掉片,一切都无从谈起。这一步关键的是玻片(Slides or Coverslips)的处理以...