1、细胞未长至 85%时,用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到生物操作台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,若培养瓶上无特殊标注,吸去剩余培养液,只留 6-8ml 培养液继续培养。细胞已长满达 85-95%。即可进行传代,具体步骤如下:1.弃去培养液,用 PBS 洗涤 1-2 次;2.加入 1.0m 胰酶消化液,37C 消化约 ...
IEC-6细胞喜欢温暖的环境,所以在37°C的恒温培养箱中培养是最佳选择。保持湿度和CO2浓度(通常为5%)也是必不可少的。 细胞的传代 🔄 当细胞达到80-90%的密度时,就可以进行传代了。使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液轻轻洗涤细胞,使其脱离培养皿。将细胞转移到新的培养皿中,添加新的培养基。通常,以1:3或1:4的比...
1、收到后及时更换培养基。传代时用含10% FBS的培养基(DMEM+10%FBS或1640+10%FBS均可)终止消化并离心收集。 2、传代需使用新的培养器皿(6cm皿或T25瓶) 3、该细胞培养时可能会有部分漂浮凋亡现象,正常换液洗掉即可。 4、4-6天左右传一次,可以传10~20代 店铺热推 店铺...
IEC-6细胞推荐使用DMEM培养基,含10%胎牛血清,在37摄氏度、5% 二氧化碳培养箱中培养,IEC-6细胞倍增时间为20-50小时不等,建议每周2-3次更换新鲜培养基,按1:3至1:5进行传代。 总结: 1. 呈上皮细胞样,贴壁生长,可广泛用在肠道生物学研究,如:肠道转运、肠吸收、肠道黏膜损伤后修复。 2. 推荐使用DMEM培养基,...
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞...
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。 b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。 方法二:可选...
IEC-6细胞传代: 1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。 2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时; (可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化...
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
传代方法: 1:2至1:6,每周2次。 冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 支原体检测: 阴性 安全等级: 1 应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。 备注: Nucleotide (GenBank) : Z46374 R.norvegicus mRNA for c-met. Nucleotide (GenBank) : AF008587 Rattus norvegicus hereditary hemochromatosis protei...
方法:肠黏膜上皮细胞株IEC-6经培养后分为正常对照组(37℃、5%CO2培养箱培养)及39℃、41℃、43℃热打击组(分别在相应温度培养箱中培养),相差显微镜观察各组细胞培养1h的形态学改变,CCK8法比较各组细胞培养0、1、3、5、7h的细胞活性和24h增殖率,流式细胞术研究细胞周期的改变。结果:与正常对照组比较,各热...