免疫荧光(IF)是二抗偶联荧光基团经过激发显色; 免疫细胞化学(ICC)通过化学反应显色; 免疫荧光(IF)利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内特定抗原进行定位和定性分析;由于特异性强、敏感性高、速度快,广泛用于科学研究。 免疫荧光(IF)的检测方法主要包括直接免疫荧光和间接免疫荧光。 免疫细胞化学 (ICC)通过使用抗...
一、IF、ICC原理解析 二、标准的ICC/IF实验步骤 Step1:样本制备 Step2:染色步骤 Step3:封片、观察 三、常见问题分析 1、二抗怎么选? 2、荧光信号有问题怎么办? 3、高背景怎么办? 4、其它高频问题汇总 推荐内容 因为原理相似,实验新手在面对IF、ICC、IHC、mIHC这几种技术时总是傻傻分不清! 如何区分IF、ICC、...
免疫荧光(IF)的检测方法主要包括直接免疫荧光和间接免疫荧光。 免疫细胞化学 (ICC)通过使用抗原抗体特异性结合反应,提供了一种半定量的方法来分析靶抗原的相对丰度、构象和亚细胞定位。 因为ICC/IF的原理和实验步骤大致相同,所以常常把 ICC/IF放在一起使用。 二、实验步骤拆解 标准的ICC/IF实验方案包括: 样本制备→...
要实现可靠一致的实验结果,对操作流程的优化必不可少。IHC/ICC/IF的原理和实验步骤大体相同,整体实验流程如下图所示。IHC、ICC、IF实验虽然原理简单,但却是很多研究僧漫漫毕业路上的绊脚石。贴心的研小编在此奉上一份超级全面的troubleshooting guide,希望能...
注意:通常用WB抗体稀释浓度为1:1000,IF/IHC为1:100,而如果可以做ELISA则可以稀释1:10000。如果一个抗体用来做ELISA的,那么言外之意就是该抗体效价不高。但不是说ELISA的抗体不能用于做WB,抗体说明书提示做ELISA稀释比例为1:1000,那么你可以试试1:100做做WB。
最常用的蛋白水解酶是胰蛋白酶、链霉蛋白酶和蛋白酶K。与HIER一样,需要测试条件以找到抗原修复的最佳条件。所用蛋白水解酶的孵育时间、温度和浓度都很关键。 希望阅读本文后,您对IF、ICC和IHC之间的区别有更好的理解。一句话总结:免疫荧光是一种检测方法,与您可能使用的样...
免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry ,ICC)都是极为常用的免疫检测技术,它们都基于抗原与抗体之间特异性结合的基本原理,通过标记物来对目标抗原进行检测和分析。尽管有相同之处,但在具体技术细节、样本处理以及应用方向上,三者存在着明显的差异。
免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)是生物学研究中经常用到的三种应用,IHC的样本类型是组织,ICC的样本类型是细胞,而IF指的是在实验中使用了荧光标记。 IHC&ICC实验大致分为样品制备(固定、脱蜡)、抗原修复(表位/抗原修复/还原)、封闭、抗体检测、显色、复染、封片等7个步骤;若与IF结合,则分...
Immunohistochemistry (IHC) - 使用抗体检测目标蛋白,并通过化学反应产生颜色变化。通常应用于冷冻或石蜡包埋的全组织切片。 Immunocytochemistry (ICC) - 与IHC类似,但应用于分离或培养获得的细胞。 Immunofluorescence (IF) - 同样使用抗体检测目标蛋白,但通过偶联的荧光团来显色。适用于组织样本和细胞样本。 🔍 现在...
免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)是生物学研究中经常用到的三种应用,IHC的样本类型是组织,ICC的样本类型是细胞,而IF指的是在实验中使用了荧光标记。 IHC&ICC实验大致分为样品制备(固定、脱蜡)、抗原修复(表位/抗原修复/还原)、封闭、抗体检测、显色、复染、封片等7个步骤;若与IF结合,则分...