人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养 1.将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。 注:4℃下最多贮存24小时,室温下不超过6小时,否则废弃) 2.用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的PBS溶液冲洗3-5次,将污 血冲洗干净为止。 3.用手术钳夹紧脐带下端,加入15ml的胶原酶(1mg/ml)室温下消化15-20 分钟,...
1、收到后及时更换培养基。传代时用含10% FBS的培养基(DMEM+10%FBS或1640+10%FBS均可)终止消化并离心收集。 2、传代需使用新的培养器皿(6cm皿或T25瓶) 3、该细胞培养时可能会有部分漂浮凋亡现象,正常换液洗掉即可。 4、4-6天左右传一次,可以传10~20代...
1.测定完培的pH,看其酸碱性是否适宜。多数细胞适宜的pH范围为7.2-7.4。 2.若培基或血清是开封存放很久的,可换用新鲜的完配给细胞换液;若都是新开封的,可换用新批次的基培或血配制培养液,给细胞换液观察。 最后要讨论的是如何解决HUVEC聚团问题,培养瓶尤其是培养板的亲水性较差时或血清中的促贴壁因子不足时,...
该补充剂最大限度地促进永生化的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的生长,该因子的添加对维持永生化的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)形态至关重要。 注意: 请务必使用以上两种推荐培养体系进行永生化的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的培养,否则可能导致细胞无法增殖。 T25瓶细胞由于运输过程影响细胞会分泌产生的少量小黑点,不是污染问题,...
本发明公开了一种人脐静脉血管内皮细胞HUVEC的分离培养方法,包括以下:步骤一,取新鲜的健康产妇新生儿脐带,冲洗,消化离心,分离出HUVEC细胞;步骤二,采用二氧化碳培养箱和完全培养基培养HUVEC细胞,获得原代内皮细胞;步骤三,将正常的内皮细胞继续消化,离心后传代培养.本发明采用新鲜的健康产妇新生儿脐带,采用I型胶原酶消化...
HUVEC细胞的培养方法 没啥特别难养的 培养基用ECM和配套的生长因子就行了
huvec细胞,于二氧化碳培养箱内在37℃下,培养24小时;2)清洗:初次培养后,倒掉培养基,并用无菌含双抗的pbs溶液清洗2-3次,洗掉血细胞和死细胞;3)二次培养:再次加入10ml新鲜的ecm完全培养基,每3天换一次培养基,直至细胞汇合至70%;之后,每2天换一次培养基,直到观察到内皮细胞长满,外观如同鹅卵石,获得原代内皮细胞...
本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。 内皮细胞的分离 1. 用铝箔覆盖软木板。 2. 将棉纸铺在铝箔上面,然后用 70 % 乙醇浸泡。 3. 挤出脐带中的血液。 4. 切除脐带一端 2 cm 或 2 cm 以上,包括动脉夹痕迹处。 5. 将 Luer 接合管外套插入静脉。
技术方案本发明主要是提供一种本发明为ー种人脐静脉内皮细胞HUVEC的分离、培养与传代方法,包括了以下步骤DHUVEC的分离取当天新生儿15-20cm长的新鲜脐带,放入无菌含双抗的PBS溶液中4°C储存;用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌含双抗的PBS溶液冲洗至流出液体中无可见血液;夹住脐带下端,加入15ml的胶原酶I型(...
【简要说明】:此文档讲述了人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养的操作步骤(Protocol)。 【下载地址】: http://pan.baidu.com/s/1bnjaXNx