1、HRP的作用原理 HRP是一种过氧化物酶,它能将双氧水(H2O2)分解为氧气(O2)和水(H2O)。当HRP和一种特定过氧化物结合在一起时,它被激活,可以将过氧化物分解为活性氧物质。因此,HRP及其分解的活性氧物质可以抑制旁路反应,并有助于受体与真核和原核表达的基因的联系,从而保持这些蛋白质的功能。 2、HRP显色技术...
显色(HRP酶) 1.增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理:氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,...
TMB显色原理:TMB是一种底物,可以被辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化而产生显色产物。在酶标记实验中,通常将TMB与过氧化氢(H2O2)混合,然后加入HRP标记的抗体或其他分子。HRP与TMB-H2O2反应产生的显色产物为蓝色,通常可通过对应波长下的吸光度测量或肉眼观察进行定量或定性分析。HRP显色原理:HRP是一...
辣根过氧化物酶的活力测定方法有多种,主要原理介绍如下:1、Rz值,提纯工作的后几步以及纯酶溶液可用Rz值表明酶的纯度。403nm处的吸收代表血红素辅基的吸收,275nm的吸收是蛋白质的吸收,结晶的HRP的Rz值为3.04。测定时的酶浓度为1毫克蛋白/毫升。2、愈创木酚法:测k4[见反应式⑶]。以愈创木酚(邻甲氧基...