以下是HPLC的一般测定方法: 1. 准备样品和标准品:将待测样品和标准品进行处理,以便与固定相或流动相分离,同时准备溶剂、试剂等。 2. 选择合适的色谱柱:根据待测物质的性质和分离要求,选择合适的色谱柱。 3. 确定流动相:流动相是HPLC中的重要组成部分,用于将样品中的各组分带入色谱柱进行分离。根据待测物质的...
8、方法优化完成后,最后在同一天同一人,用同一台机器,对所有样品进行分析测定,具有可比性。9、方法摸索优化实验采用工艺已经确定的实验室小试、实验室放大样品进行,前期用于原料合成样品配合检测时,可以采用大范围的梯度洗脱进行模糊检测分析。 专属性目的为了验证方法对目标成分检测的区分能力及全面的杂质分析评价。DAD...
HPLC法测定有关物质中已知杂质的测定方法很多, 计算方法也相应很多,每种计算方法都有不同的意义及其优缺点, 下面参考国内外药品标准和相关期刊文献, 结合在药品检验中的实际工作, 对这些计算方法作一简单探讨, 以期为药品质量标准的建立或进行相关研究时对有关物质检查中已知杂质的计算方法的选择提供借鉴和参考。表1...
在HPLC中,常用的检测器有紫外-可见光谱检测器(UV-VIS)、荧光检测器、电化学检测器等。检测器的选择应根据分析目标物的性质和分析要求来确定。 二、HPLC的测定方法 1.样品制备 在进行HPLC分析之前,需要对样品进行适当的处理和制备。常见的样品制备方法包括提取、浓缩、稀释等。样品制备的目的是提高分析物的浓度,减少...
1)HPLC的原理是采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定,并进入检测器,由记录仪,积分仪或数据处理系统记录色谱信号 (2分) 2)其系统性试验包括: (8分) ①色谱柱的理论塔板数 ②分离度(R) ,定量分析时要求分离度应大于1.5 ③重复性 除有特别规定外,连续进样5次,其峰面积的相对偏...
通过内标法、外标法等方法可以提高测定的准确性和可靠性。 三、HPLC测定方法的优化和验证 3.1方法的优化 在建立分析方法的过程中,可以通过调整色谱柱、流动相、柱温等条件,来优化方法的选择和分离效果。并使用质量控制样品和质谱等仪器进行方法的验证和验证。 3.2方法的验证 方法的验证是为了确定分析方法的准确性、...
HPLC法检测有关物质的方法有: (1)杂质对照品法(适用于已知杂质); (2)主成分自身稀释对照法(适用于一般杂质检查,杂质成分少且尚不能取得其对照品,简称“自身对照法”); (3)归一化法(现已不多用)。 前法为外标法、定量检测;后两法均为限量检测。自身...
在进行HPLC分析时,合理选择色谱条件和测定方法非常重要,本文将对HPLC的色谱条件和测定方法进行一步一步的解释。 第一步:选择合适的色谱柱 HPLC色谱柱的选择取决于样品的性质和分析的目的。常见的色谱柱类型包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、正相色谱柱、大小分子排阻色谱柱等。根据样品的特性,选择合适的柱床填料和柱...
下面是测定方法的步骤: 1.样品准备:首先需要将待测样品溶解在合适的溶剂中,以便在HPLC中进行分析。可以根据样品的性质选择不同的溶剂并进行适当的稀释。 2.样品注射:将样品溶液注入到色谱仪的进样器中。注射量可以根据要求和仪器的规格进行调整。 3.色谱运行:开启HPLC系统,调节流速和温度等色谱条件。样品溶液通过...