在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的
离液盐在RP-HPLC中非常重要的应用是增强碱性化合物的保留。据估计,现在大约有80%的药物分子中含有碱性官能团,但是由于其在RP-HPLC上的保留随流动相pH的变化太极端,且容易与硅胶基质色谱柱中残留硅醇作用而拖尾,因此这些化合物的RP-HPLC分析一直存在挑战性,而阴离子型...
HPLC RP法的操作步骤如下: 1. 准备样品溶液:将待测样品溶解于适当的溶剂中,并通过滤膜过滤以去除固体颗粒。 2. 准备流动相:根据样品性质和分离要求,选择合适的流动相组成,并进行气泡去除。 3. 设置仪器参数:根据样品性质和柱特性,设置合适的流速、柱温和检测器参数。 4. 进样:将样品溶液注入进样器中,控制注...
Besides RP-HPLC, they are also used in ion-pair chromatography (IP), hydrophobic interaction chromatography (HIC), and nonaqueous reversed-phase chromatography (NARP). The main commercial types of stationary phases used in RP-HPLC are included in this section and in Appendix 2 . Basic physical...
RP-HPLC是HPLC的一个部分。只不过占有比例较大。色谱:色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。高效...
反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用,是液相色谱的主要的分离模式,非极性固定相与溶质的非极性部分相互作用,而极性流动相则与溶质的极性部分相互作用,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。检测步骤通常包括样品准备...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟…
HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
文1:RPHPLC测定熊去氧胆酸片中熊去氧胆酸含量及有关物质 熊去氧胆酸是一种亲水性胆汁酸,其化学结构为3a,7β二羟基一5β胆烷酸[1]。熊去氧胆酸片纯品为白色粉末,以酸碱滴定法和薄层法为标准含量测定方法,存在专属性不强、精确度不高的不足。本文拟建立一种熊去氧胆酸片中熊去氧胆酸含量的RP-HPLC方法。
rp-hplc名词解释rp-hplc名词解释 RP-HPLC(Reverse Phase High Performance Liquid Chromatography)是一种高效液相色谱技术,它常被用来分离、测定和检测各种有机物和生物分子。该技术利用从非极性溶剂中到极性溶剂的差异进行分离,基于molecular recognition的作用机构,通过不断地调节溶剂组份的浓度,使有机溶剂与采样物料在...