HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
HPLC RP法的操作步骤如下: 1. 准备样品溶液:将待测样品溶解于适当的溶剂中,并通过滤膜过滤以去除固体颗粒。 2. 准备流动相:根据样品性质和分离要求,选择合适的流动相组成,并进行气泡去除。 3. 设置仪器参数:根据样品性质和柱特性,设置合适的流速、柱温和检测器参数。 4. 进样:将样品溶液注入进样器中,控制注...
区别一（柱子）：HPLC(高效液相色谱法)与RP-HPLC(反相高效液相色谱法)的区别除了填充柱的不同外，还有...
1. 分离机理不同:HPLC是根据物质的极性和亲水性进行分离的。而RP-HPLC则是根据物质的亲脂性和疏水性进行分离的。 2. 使用范围不同:HPLC适用于极性物质、离子物质、水溶性化合物等分析,而RP-HPLC适用于非极性物质、脂溶性化合物等分析。 3. 应用领域不同:HPL...
反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用，是液相色谱的主要的分离模式，非极性固定相与溶质的非极性部分相互作用，而极性流动相则与溶质的极性部分相互作用，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。检测步骤通常包括样品准备...
反相高效液相色谱(RP-HPLC):结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce等利用多线性回归方法对2106种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2～20氨基酸组成的肽中,可减少在柱上的保留...
RP-HPLC是HPLC的一个部分。只不过占有比例较大。色谱：色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。
RP-HPLC中的离液剂:原理与应用 根据统计,超过半数的药物分子含有碱性官能团。在常用的中性和酸性条件下,这些碱性基团一般以带正电荷的状态存在,亲水性增强,疏水保留减弱,同时由于存在与常用的硅胶基质的色谱柱上残留硅羟基的强的次级作用(如离子交换等),因此可能带来峰型的问题。
RP-HPLC使用非极性的固定相(通常为C18或C8烷基链)填充在色谱柱中。样品在溶剂流动的影响下,与固定相发生相互作用,分离出来。在RP-HPLC中,极性的化合物会更快地溶解在溶剂中并通过流动,而非极性的分析物则会更容易与固定相发生相互作用,滞留时间较长。 应用: RP-HPLC广泛应用于化学、生物、制药、食品等领域的分...
离液盐在RP-HPLC中非常重要的应用是增强碱性化合物的保留。据估计,现在大约有80%的药物分子中含有碱性官能团,但是由于其在RP-HPLC上的保留随流动相pH的变化太极端,且容易与硅胶基质色谱柱中残留硅醇作用而拖尾,因此这些化合物的RP-HPLC分析一直存在挑战性,而阴离子...