所以与非还原 CE-SDS相比, SEC-HPLC可更加客观地评价样品中总多聚体的百分比含量。该研究分析的单抗样品多聚体主要是以非共价键的形式连接,所以应注意两种方法所得到的多聚体含量结果具有不同的含义,在分析多聚体含量时,常规 SEC-HPLC分析比 CE-SDS分析更加客观。 对于片段分析,由下图可以看出,非还原 CE-SDS所...
图1: SEC-HPLC方法纯化circRNA(Orna Therapeutics公司)二、Rznomics基于RP-HPLC制备高纯度circRNA 反相色谱法（RP-HPLC）利用分子间的极性差异进行物质分离，也能够有效纯化circRNA。离子对-反相色谱法（IP-RP-HPLC）在流动相中添加离子对试剂，可以增强样品的保留能力。2023年8月，韩国生物制药公司Rznomics团队在Mol ...
如果样品的纯度较低,可能需要进行进一步的纯化步骤,如亲和层析、离子交换层析等。 SEC-HPLC是一种常用的蛋白质纯度检测方法,通过分析蛋白质样品在凝胶柱中的分离情况,可以评估样品的纯度。在进行SEC-HPLC检测时,需要准备好合适的设备和试剂,进行样品制备和注射,设置合适的流动相条件和检测器参数,最后进行数据分析和结果...
SEC分析可用于质量控制,也可用于纯化工艺的优化和开发。 下文说明了在下游工艺过程中记录的SEC色谱图。单克隆抗体在一系列连续的步骤中被纯化。首先实行细胞收获、澄清和浓缩步骤,然后实行捕获步骤(蛋白A亲和层析)。然后,实行中间步骤除去污染物(例如阳离子交换剂),然后实行抛光步骤即完成(阴离子交换剂)。随后,进行病毒...
图1: SEC-HPLC方法纯化circRNA(Orna Therapeutics公司) 二、Rznomics基于RP-HPLC制备高纯度circRNA 反相色谱法(RP-HPLC)利用分子间的极性差异进行物质分离,也能够有效纯化circRNA。离子对-反相色谱法(IP-RP-HPLC)在流动相中添加离子对试剂,可以增强样品的保留能力。
在基于I型内含子自剪接的PIE环化体系中,circRNA与线性前体RNA、nicked RNA存在分子量和构象差异,理论上可以通过SEC-HPLC实现分离和纯化。 2018年,Orna Therapeutics创始人兼麻省理工学院教授Daniel G. Anderson在Nat Commun【16.6】发表研究成果,他们将SEC-HPLC与RNase R消化法相结合,进一步放大了circRNA、线性前体RNA及n...
3. 尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography,SEC) 尺寸排阻色谱法是一种常用的蛋白质分离和纯化方法。该方法基于蛋白质的分子大小和形状来实现分离。尺寸排阻色谱法可以根据蛋白质的分子大小进行选择性分离,适用于分析和纯化不同分子大小的蛋白质。 优点: ...
图1: SEC-HPLC方法纯化circRNA(Orna Therapeutics公司) 二、Rznomics基于RP-HPLC制备高纯度circRNA 反相色谱法(RP-HPLC)利用分子间的极性差异进行物质分离,也能够有效纯化circRNA。离子对-反相色谱法(IP-RP-HPLC)在流动相中添加离子对试剂,可以增强样品的保留能力。
在重组蛋白的纯度检验、生物药的多聚体分析中经常会使用到UHPLC-SEC方法。但在进行微量分析时候,SEC色谱柱中的蛋白质有时会因非特异性吸附而导致定量和重现性出现问题。另外,在使用光散射分析多聚体或质谱分析时,有时会因为柱流失产生的干扰物质而无法进行精确检测。东曹新一代UHPLC-SEC色谱柱TSKgel UP-SW3000-...
如果纯化出的蛋白质经过SDS-PAGE检测没有其他杂带，说明蛋白质的纯度较高，但如果SEC-HPLC检测出了多个...