HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
HPLC RP法的操作步骤如下: 1. 准备样品溶液:将待测样品溶解于适当的溶剂中,并通过滤膜过滤以去除固体颗粒。 2. 准备流动相:根据样品性质和分离要求,选择合适的流动相组成,并进行气泡去除。 3. 设置仪器参数:根据样品性质和柱特性,设置合适的流速、柱温和检测器参数。 4. 进样:将样品溶液注入进样器中,控制注...
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
RP-HPLC 是一种有效的多肽/蛋白纯化工具。通过RP-HPLC 法可以把粗品中的杂质分离得到目标多肽/蛋白。收集到的多肽、蛋白片段可以用于进一步研究,也可以作为治liao药物。 在蛋白/多肽分析过程中,色谱条件优化的目标是优化分辨率和保留时间。 制备色谱法分离蛋白/多肽时,色谱条件的开发主要是三个参数的优化(参见图1)...
rp-hplc高效液相色谱仪 更新时间:2024年12月20日 综合排序 人气排序 价格 - 确定 所有地区 实力供应商 已核验企业 在线交易 安心购 查看详情 ￥888.00/台 广东广州 日本岛津Nexera XS inert生物惰性超高效液相色谱仪 色谱柱耗材配件 在线交易 日本岛津品牌 广东晟泽科技有限公司 3年 ...
RP-HPLC使用非极性的固定相(通常为C18或C8烷基链)填充在色谱柱中。样品在溶剂流动的影响下,与固定相发生相互作用,分离出来。在RP-HPLC中,极性的化合物会更快地溶解在溶剂中并通过流动,而非极性的分析物则会更容易与固定相发生相互作用,滞留时间较长。 应用: RP-HPLC广泛应用于化学、生物、制药、食品等领域的分...
RP-HPLC的原理是基于溶剂在填料上的吸附和解吸作用。填料的极性决定了化合物在其上的吸附性能,而移动相的极性决定了化合物在填料上的解吸性能。在RP-HPLC中,填料的反相特性使得非极性和弱极性化合物更容易被吸附,并随后被分离。 RP-HPLC的步骤包括样品的预处理、色谱柱的平衡和实际的分离过程。首先,样品必须被准备...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟乙酸 三氟乙酸(TFA)是最常用的离子对试剂。将浓度为~0.1%的三氟乙酸加入流动相,会在大多数柱上产生良...
区别二（流动相）：HPLC使用的流动相为一些极性小的有机溶剂 RP-HPLC使用的流动相为甲醇-水，乙腈-水...
离液盐在RP-HPLC中非常重要的应用是增强碱性化合物的保留。据估计,现在大约有80%的药物分子中含有碱性官能团,但是由于其在RP-HPLC上的保留随流动相pH的变化太极端,且容易与硅胶基质色谱柱中残留硅醇作用而拖尾,因此这些化合物的RP-HPLC分析一直存在挑战性,而阴离子...