SEC-HPLC(尺寸排阻高效液相色谱)是一种基于分子大小分离的HPLC技术。它利用具有不同孔径的固定相(填料)对样品中的蛋白质进行分离,使得大分子先于小分子通过色谱柱,从而实现蛋白质的分离和纯度分析。 二、HPLC蛋白纯度分析原理 HPLC蛋白纯度分析的原理基于蛋白质在移动相(溶剂)中通过固定相(色谱柱填料)时的相对迁移速率。
HPLC可以测纯度,也可以测含量。它是一个非常强大的化学分析工具。 测纯度: 在药物分析中,HPLC能够帮助我们确定药物的纯度和安全性。通过分离药物中的杂质和活性成分,我们可以比较杂质峰和纯净药物峰的相对峰面积,从而计算出杂质的含量。 此外,HPLC也用于蛋白纯度分析。 测含量: HPLC在含量检测方面同样出色,能够测定食...
hplc在测试化合物纯度时对样品要求更宽容,无需高温汽化即可分析,适合分子量大、极性强的物质。许多药物分子属于热敏感型,例如维生素C、抗生素类物质在高温下易分解,gc需要高温汽化容易破坏这类物质,hplc常温分离环境能保持样品完整性。中药提取物中的黄酮类、皂苷类大分子物质用gc难以汽化,hplc使用液相流动相可轻松分离...
首先,蛋白质的测定一般用凝胶渗透色谱分子量测定:用HPLC测定几个分子量已知的蛋白质,绘制分子量与调整保留时间相对应的标准曲线,然后再在相同条件下测未知蛋白的保留时间,用标准曲线对照即可的未知蛋白的分子量;含... 分析总结。 用hplc测定几个分子量已知的蛋白质绘制分子量与调整保留时间相对应的标准曲线然后再在相...
HPLC自20世纪60年代发展起,逐渐成为蛋白纯度测定的主流方法。HPLC测定蛋白纯度原理基于不同蛋白质在色谱柱上的保留行为差异,如疏水作用(RP-HPLC)、离子交换作用(IEX-HPLC)或分子大小排阻(SEC-HPLC)。这一技术利用色谱柱上的分离效果,以及一个灵敏度高的检测器,可以快速、准确地测定蛋白纯度。 一、HPLC测定蛋白纯度...
内标法用于GC和HPLC减小测定误差,曾经起到很好的作用 HPLC: High Performance Liquid Chromatography 本法的精密度为批内变异系数<4.6%,批间变异系数<6.1%;最低检出限(信噪比=2)为3.1nmol/L;线性范围为50～1 000nmol/L;r=0.9996;平均回收率为97.1%. 该法在分离多组分混合物时,除第一组分外,其余均非纯态,...
使用HPLC确定样品纯度的过程涉及多个步骤。首先,通过将其溶解在合适的溶剂中来制备样品。溶剂的选择取决于样品的溶解度和所需的色谱分离条件。然后将样品溶液注入HPLC系统,该系统由泵、进样器、色谱柱和检测器组成。 泵以受控的流速将样品溶液输送通过色谱柱。色谱柱填充有固定相,固定相是一种以特定方式与样品组分相互...
原料药的纯度检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、熔点测定法、比旋光度测定法、差示扫描量热法，其中HPLC纯度分析是药物研发和生产过程中的关键方法，通过分离检测可以确切地知道一个原料药中是否存在任何杂质或降解产物。HPLC法的精密度高，批内变异系数小于4.6%，批间变异系数小于6.1%，最低检出限（信噪比=2...
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用，导致峰展宽...
HPLC(高效液相色谱法)是一种广泛应用于分析样品纯度的技术。该过程涉及多个步骤,以确保准确可靠的结果。 首先,样品通过溶解在适当的溶剂中为分析做好准备。溶剂的选择将取决于样品的性质和感兴趣的分析物。重要的是要确保样品完全溶解,以避免分析过程中出现任何潜在问题。 接下来,准备好的样品被注入HPLC系统中。样品通...