(4)基于测序的分型方法:SBT(Sequencing-Based Typing)是用两侧引物对HLA基因多态性的区域进行PCR扩增,然后对扩增产物进行Sanger测序,获得HLA等位基因序列从而进行分型。SBT技术是目前HLA基因分型的金标准,具有分辨率高、准确性高以及特异性强的特点,但其针对HLA-I类基因的第2、3、4外显子以及HLA-II类基因第2...
(4)基于测序的分型方法:SBT(Sequencing-Based Typing)是用两侧引物对HLA基因多态性的区域进行PCR扩增,然后对扩增产物进行Sanger测序,获得HLA等位基因序列从而进行分型。SBT技术是目前HLA基因分型的金标准,具有分辨率高、准确性高以及特异性强的特点,但其针对HLA-I类基因的第2、3、4外显子以及HLA-II类基因第2、3...
(4)基于测序的分型方法:SBT(Sequencing-Based Typing)是用两侧引物对HLA基因多态性的区域进行PCR扩增,然后对扩增产物进行Sanger测序,获得HLA等位基因序列从而进行分型。SBT技术是目前HLA基因分型的金标准,具有分辨率高、准确性高以及特异性强的特点,但其针对HLA-I类基因的第2、3、4外显子以及HLA-II类基因第2、3...
目前实验室HLA分型大多为基因分型方法,主要包括低分辨水平的PCR-序列特异性引物基因扩增法(sequence specific primer, SSP)、中分辨水平的PCR-序列特异性寡核苷酸探针法(sequence-specific oligonucleotide, SSO)、基因芯片和高分辨水平的PCR-直接测序分型(sequence-based typing, SB...
(4)基于测序的分型方法:SBT(Sequencing-Based Typing)是用两侧引物对HLA基因多态性的区域进行PCR扩增,然后对扩增产物进行Sanger测序,获得HLA等位基因序列从而进行分型。SBT技术是目前HLA基因分型的金标准,具有分辨率高、准确性高以及特异性强的特点,但其针对HLA-I类基因的第2、3、4外显子以及HLA-II类基因第2、3...
因此,HLA分型检测在移植医学、免疫类相关疾病研究、药物反应、血小板输注等领域具有重要意义。目前主要的分型方法包括 SBT (Sequencing based typing)、SSP (sequence-specific primer)、SSO (sequence-specific oligonucleotide) 以及高通量测序等。 纳昂达的HLA分型方案基于探针液相杂交捕获,完美适配华大智造的三款测序...
1、高通量:相比于传统的sbt和sso等方法,使用二代测序的方法对hla进行分型具有高通量的特点,每个样本在pcr扩增后单独进行文库构建,并在最终上机测序时混合在一起。测序反应每次最多可以同时测定480个样本,每个样本从dna提取到测序结束,全部流程可短至2天,效率远高于传统的sbt和sso等方法。
PCR-SBT方法是双等位基因测序,出现模棱两可的结果是该方法固有的缺陷。模棱两可的基因型结果是指在HLA基因分型过程中,标本指定结果中存在一种以上的HLA等位基因组合方式,可以加做GSSP对模棱两可的结果进行区分。此外,由于DRB1等位基因上的DRB1*12:01/10与DRB1*14...
目前常用的基因分型技术是随着聚合酶链扩增技术(PCR)的应用发展起来的,主要包括限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、序列特异性寡核甘酸探针(PCR-SSO)、序列特异性引物(PCR-SSP)、直接测序分型(PCR-STB)等。其中SBT是以Sanger测序(双脱氧链ddNTP末端终止测序法)为基础的HLA分型方法,该方法具有分辨率高,可以直接读取...