二级学科），主要组织相容性复合体和遗传（三级学科）常用技术有：PCR-SSO(对PCR扩增产物作特异性寡核苷酸探针杂交)、PCR-SSP(以等位基因特异性引物扩增模板DNA直接分析PCR产物的特性)、PCR-RLFP(对类别特异性引物扩增产物作限制性内切酶切割，分析片段长度多态性)和基于测序的HLA分型(对PCR扩增产物直接测序)。
目的:建立快捷、特异的PCR SSP检测HLA B2 7基因的方法。方法 :以钾缓冲液提取 5 0～ 2 0 0 μl外周血中的DNA ,设计序列特异性的HLA B2 7引物进行PCR扩增检测HLA B2 7基因 ,结果与淋巴细胞毒方法 (MLCT)相对比。结果 :所设计引物可扩增出目的基因片段 ,钾缓冲液提取DNA可满足PCR要求 ,全部检测过程可在...
HLA分型技术-pcr ssp 第七章 人类白细胞抗原血型系统 一、概述 ••••二十世纪初发现移植排斥现象免疫反应本质主要组织相容性抗原复合体（MHC）与移植排斥有关，也参与机体免疫应答得诱导和调节•MHC结构、功能、进化及其与临床医学之间的关系，是近代免疫遗传学研究的核心 二、人类MHC •发现人类第一个...
基因芯片是近年发展起来的一项新技术,将其与PCR-SSO结合应用于HLA分型,可使分型趋于规模化和自动化,尤其在HLA多态性和疾病遗传背景分析等方面更具优势。 (三)PCR/SSP分型法 该方法应用设计的一套HLA等位基因的序列特异性引物(SSP),对待测DNA进行PCR扩增,从而获得HLA型别特异性的扩增产物。
1)提取DNA 同前RFLP法 2)PCR扩增 操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3)凝胶电泳 取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内加入溴化乙锭,在电压15V/cm凝胶条件下电泳20...
PCR-SSP/PCR-SBT-HLA高分辨等位基因分型比较 热度: HLA 分型(PCR-SBT)法件应用介绍:HLA typing (PCR-SBT) method described application 热度: a1 第七章 a2 一、概述 •二十世纪初发现移植排斥现象 •免疫反应本质 •主要组织相容性抗原复合体(MHC) ...
针对聚合酶链反应-序列特异性引物 (polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP) 的 HLA 基因分型检测方法,Medix Biochemica HiDi®系列原料酶对于引物3'末端仅单独一个错配,即具有高特异性,且无论是转换型或颠换型错配,均可高效鉴别,极大程度提高了HLA基因分型的效率、灵敏度和准确性。
3)PCR/SSP技术 目前常规的HLA-DNA分型技术,包括上述的PCR/RFLP、PCR/SSO等,最终均需用标记的特性探针与扩增产物进行杂交,再分析结果。PCR/SSP方法用乃设计出一整套等位基因组特异性引物,借助PCR技术获得HLA型别特异的扩增产物,可通过电泳直接分析带型决定HLA型别,从而大大简化了实验步骤。
以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点。2001年3-6月,我科对全部进行HLA-B27检测的病人运用PCR-SSP法进行检测的同时,也进行了血清学检测,现报告如下: