1. 复苏细胞：将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm 皿中，加入约8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。2. 细胞...
(1️⃣) 消化细胞,取少量细胞悬液进行计数。细胞悬液经过250g离心4分钟。🧪 (2️⃣) 离心后倒掉上清液,用适量4℃预冷的冻存液重新悬浮细胞。然后按比例或数量将细胞分装到冻存管中。一般冻存密度为(1.0~2.0)×10^6个/mL。💧 注意:如果用冻存液重悬计数后,细胞长时间放置在非培养条件下会严重影...
1.复苏细胞:将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟,弃去上清液,补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm 皿中,加入约8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 2. 细胞传代:...
1. 复苏细胞:将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟,弃去上清液,补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm 皿中,加入约8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 2. 细胞传代:...
HK-2细胞是贴壁依赖性的，不会在甲基纤维素、软琼脂或悬浮液中生长。HK-2细胞可以重现用新鲜分离的PTC获得的实验结果。HK-2细胞在毒理学研究中有应用。HK-2细胞培养注意事项 1细胞内有空泡：培养时可见部分细胞的胞质内存在空泡，这是该细胞正常的生理活动，不影响生长，无需担心。2细胞生长速度偏慢：注意控制...
第二种情况是营养不良,拉丝的细胞占大多数,同时细胞生长缓慢,此时可以提高血清比例(不超过20%)或添加5 ng/mL EGF。 2.形态不对 正常的HK-2呈铺路石状生长,如果细胞呈镰刀状或不规则状(如下图),可能是因为培养环境发生了较大的改变,比如从有血清到无血清的转换,此时换回原来的培养条件细胞可逐渐恢复;如果细胞...
选择合适的培养基及血清，同时加大细胞接种密度可以改善。培养基选择 HK-2最初建系使用无血清培养，众多文献以及实践证明MEM、DMEM或DMEM/F12添加10%胎牛血清的条件下，HK2细胞也能良好生长。但胎牛血清的质量是关键，胎牛血清品质越高，HK-2状态越好。若使用无血清培养基培养，需要使用多聚赖氨酸或者明胶包被培养瓶...
在培养HK2细胞中，常出现空泡问题。空泡可能是正常的细胞活动，通常传代后空泡会减轻。若生长速度减缓且形态异常，空泡可能是自噬行为，可以尝试提高血清比例或更换血清品牌。细胞拉丝问题有两种可能。一种是HK2细胞迁移导致，这种情况下的拉丝细胞占少数，细胞整体生长状态正常，无需特殊处理。另一种是营养不...
第二种情况是营养不良,拉丝的细胞占大多数,同时细胞生长缓慢,此时可以提高血清比例(不超过20%)或添加5 ng/mL EGF。 2.形态不对 正常的HK-2呈铺路石状生长,如果细胞呈镰刀状或不规则状(如下图),可能是因为培养环境发生了较大的改变,比如从有血清到无血清的转换,此时换回原来的培养条件细胞可逐渐恢复;如果细胞...
细胞的生长特性为上皮细胞样，贴壁生长，需在含有10% FBS和1% P/S的MEM培养体系中进行。推荐传代比例为1:3-1:4，每周换液2-3次，传代周期约24-48小时，培养环境需保持在37℃的气相环境中，5% CO2。冻存条件是60%基础培养基+30% FBS+10% DMSO，建议在液氮中长期储存。在培养HK-2细胞时，...