载体又名: HIV-1 NL4-3 Infectious Molecular Clone (pNL4-3)、 HIV-1 vector pNL4-3、pNL4-3载体、pNL4.3载体 质粒类型: 哺乳动物细胞载体;逆病毒包装载体 高拷贝/低拷贝: 高拷贝 克隆方法: 限制性内切酶,多克隆位点 启动子: CMV 载体大小: 14825 bp 5' 测序引物及序列: --
网络出版时间: 网络出版地址:◇实验方法学◇VSVG/HIV1NL43Luc假病毒筛选抗 HIV 1药物的条件优化及应用王 萍1,2 ,陈欢2,3 ,罗荣华 2 ,卿晨1 ,张高红 2 ,郑永唐 2(1.昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,云南 昆明 650500;2.中国科学院昆明动物研究所,中国科学院和云南省动物模型与人类疾病...
水平与加入的病毒量呈剂量依赖关系。比较3种实验条件 下不同阳性药物抑制VSVG/HIV 1 NL4 3 Luc的半数有效剂量 浓度EC 50 ,发现第3种条件最优。而用该假病毒对合成化合 物进行筛选,发现其EC 50 与病毒HIV 1 ⅢB 所得EC 50 基本一 致。结论 成功建立并优化了基于VSVG/HIV 1 ...
我们已经报道CD4与HIV gp120的结合抑制了T细胞受体诱导的JAK3激活和表达。我们还显示,虽然某些HIV-1菌株(例如NL4-3)诱导受感染的CD4(+)T细胞凋亡,但其他菌株(例如HIV-1 IIIB)却不会。有趣的是,我们在这里表明,用HIV-1 NL4-3(而不是MB)感染CD4(+)T细胞会抑制JAK3的激活和表达。通过TCR / CD3刺激后,感染...
为了探究USP21介导的HIV感染抑制是否与其去泛素化酶活性相关,将HIV-1NL4-3感染性克隆与USP21 WT或去泛素化酶缺陷型突变体(C221A)共转染到HEK293T细胞中。USP21 WT的过表达显着降低了上清液中细胞内HIV-1 Gagp55和CAp24的表达以及HIV-1的产生,而USP21 C221A突变体导致HIV-1病毒蛋白的表达和HIV-1产量减少50...
体外抗病毒活性测定:在 TZM-bl 细胞中评估化合物对野生型(NL4-3)及多种耐药 HIV-1 毒株(如 GH9、p1579、p5375 等)的抑制活性,测定半数有效浓度(EC50)、半数细胞毒性浓度(CC50)及选择性指数(SI)。 耐药性筛选与基因分析:在 MT-4 细胞中通过逐步增加药物浓度对 HIV-1 野生株(IIIB)进行传代培养,筛选耐药...
据报道,SLFN5在N-末端含有一个DNA结合结构域,这增加了SLFN5通过直接结合抑制HIV LTR启动子的可能性。为验证这一假设,作者使用转染了SLFN5-Myc和NL4-3luc.RE-DNA的HEK293T细胞进行染色质免疫沉淀(ChIP)测定(ChIP-seq和ChIP-qPCR)。 图5:SLFN5通过与U5-R区域结合抑制HIV-1 LTR转录并减少RNA PoL II募集 ...
据报道,SLFN5在N-末端含有一个DNA结合结构域,这增加了SLFN5通过直接结合抑制HIV LTR启动子的可能性。为验证这一假设,作者使用转染了SLFN5-Myc和NL4-3luc.RE-DNA的HEK293T细胞进行染色质免疫沉淀(ChIP)测定(ChIP-seq和ChIP-qPCR)。 图5:SLFN5通过与U5-R区域结合抑制HIV-1 LTR转录并减少RNA PoL II募集 ...
1995). This vector is a modified form of the HIV-1 provirus NL4-3 in which a firefly luciferase gene replaces nef and a frameshift mutation has been inserted in env. As a result of the frameshift in env, the virus is restricted to a single-cycle of replication. Following infection and...
The primer used for the first strand cDNA synthesis (HIV IN N-terminal reverse primer 5′-CACTAGCCATTGCTCTCC-3′) was designed using complementary regions from the pol regions of strains NL4–3 and BRU of HIV-1 RT. The RT gene was then amplified from cDNA, using pfu DNA polymerase with...