Ni IDA Beads 可以用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞) 的组氨酸标签(6xHis-tagged)蛋白的纯化。它是以 4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法 偶联了三配位的亚氨基二乙酸(IDA),螯合镍离子(Ni )后,可以形成比较稳定的平面四 边形结构, 从而有更多的位点与组氨酸标签上的咪唑环继续配位, ...
5.在Ni柱中加入等体积的bingdingbuffer,制成50%的slurry Ni柱子的beads浸泡在20%ethanol中,倾除20%ethanol溶液,用蒸馏水将beats调成75%(v/v)的浓浆状的凝胶。.沿玻璃棒一次倒入柱子中,静置。 3.样品与Ni柱结合 1.每1ml50%的slurry中加入4ml的样品。1ml50%的slurry可结合20mgHis- 蛋白 2.将混合物室温,...