如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
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因此,为了进一步研究 Nrf2 的作用,我们需要构 建 Nrf2 基因的过表达和敲减细胞株,以便在体外研究芹菜素对非酒精性脂肪 肝的改善机制。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 OPTI-MEM 培养基、脂质体 LipofectamineTM 2000、Blasticidin、PEG- itTM Virus Precipitation Solution (5×)购于 Invitrogen 公司,抗生素(100 μ...
以便进一步研究基因的作用.首先将调控质粒 pCDNA6/TR 转染 SK-Hep1 细胞,经潮霉素筛选得到多个稳定单克隆.各个单克隆分别扩大培养后,转染 pCDNA4/TO/lacZ 质粒,再经过 DOX(强 力霉素)诱导表达,检测 β-半乳糖苷酶(β-D galaetosidase,β-gal)活性,从而筛选出高诱导水平低背景表达的 SK-Hep1 tet-on 细胞...
ＳＫ－Ｈｅｐ１细胞在ＤＭＥＭ培养基， 含１０％胎牛血清、１００ ＩＵ／ｍｌ青霉素、１００ ｇ／Ｌ链霉素， ５％ ＣＯ２，３７ ℃条件下培养。线粒体ＤＮＡ缺失ＳＫ－Ｈｅｐ１细胞（ρ°ＳＫ－Ｈｅｐ１）由本实验室诱导、保存［４］， 在高糖ＤＭＥＭ培养基中， 含１００ µｇ／Ｌ丙酮酸、...
结果: 1,台盘蓝排除法鉴定p0SK-Hep1细胞在含100μg·L-1EB,未添加丙酮酸与尿嘧啶的培养基中,第6天几乎观察不到活细胞;在包含100μ g·L-1EB,丙酮酸和尿嘧啶的培养基中,p0SK-Hep1细胞贴壁存活,极少数细胞悬浮. 2,在SK-Hep1细胞中COX-Ⅰ,COX-Ⅱ和内参(GAPDH)均表达,而在p0SK-Hep1细胞中COX-Ⅰ,...
2015年的数据显示,肝癌在我国的新发病例约有40万,占全世界的50%以上,严重影响着我国人民的身体健康和生活质量1材料和方法1.1细胞凋亡和细胞凋亡检测肝癌SK-Hep1细胞购于中科院上海细胞库,培美曲塞和舒尼替尼购于齐鲁制药公司,RPMI-1640培养基、胎牛血清、噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜和胰蛋白酶均购自美国Sigma公司,...
2015年的数据显示, 肝癌在我国的新发病例约有40万, 占全世界的50%以上, 严重影响着我国人民的身体健康和生活质量 1 材料和方法 1.1 细胞凋亡和细胞凋亡检测肝癌SK-Hep1细胞购于中科院上海细胞库, 培美曲塞和舒尼替尼购于齐鲁制药公司, RPMI-1640培养基、胎牛血清、噻唑蓝 (MTT) 、二甲基亚砜和胰蛋白酶均购...
1.3.2 HEK293T、SK-Hep1细胞培养 分别采用含10%胎牛血清的DMEM及α-MEM培养基,37 ℃、5% CO2细胞培养箱培养。 1.3.3 Gv-NTCP慢病毒包装 转染前24 h,将对数生长期的HEK293T细胞以5 ×106/ 15 mL接种于10 cm细胞培养皿。待细胞密度达80%时进行转染。转染前2 h将细胞培养基更换为无血清培养基。按照Lipo...
常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响