4.HEK293 细胞培养基础知识 培养条件 相关信息 倍增时间 HEK293细胞系的倍增时间为24至45小时，平均为30小时。生长特性 HEK293 细胞可以贴壁和悬浮形式生长。贴壁细胞以单层形式生长，而悬浮培养物以球体形式生长。传代建议 在生长期以 80-90% 汇合度分裂细胞。使用 Accutase 分离细胞，并以 1 至 4 x 104 个...
●细胞培养建议使用优质培养体系并保证温度、湿度、二氧化碳浓度适宜,能有效避免细胞吹散后在贴壁时再聚团的现象, 也可以减轻细胞聚团后无法重新摊开生长的症状; ●培养过程中轻微聚团可以稍微延长消化时间并在消化终止后将细胞悬液静置1-2min,让大团细胞下沉后尽量吸取上层的分散细胞传代,聚团过于严重的建议重新培养或...
(2)培养基配制:选用适宜的HEK293细胞培养基,如DMEM、MEM等,添加适量的血清、抗生素等成分。 (3)细胞准备:将HEK293细胞从冻存管中复苏,传代至足够的数量,确保细胞活力在90%以上。 2.种子细胞接种 (1)将生物反应器内胆清洗干净,用70%酒精消毒,再用无菌水冲洗干净。 (2)将配制好的培养基加入生物反应器内胆,确...
1.不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。 2.通过离心的方式收集细胞,然后将细胞沉淀加入5-8ml的完全培养基轻轻吹打均匀后移入新的T25培养瓶中培养。 培养时的注意技巧 换液前将培养瓶竖在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后...
当停止培养HEK293细胞时,需要对培养基的配制和富集物进行封存处理。应该使用-80℃低温存储,或N2液体氮存储。当需要重新开始培养时,应该使用稳定的细胞株以保证培养质量。 总之,对于HEK293细胞培养,合理规划培养基筛选、控制培养环境和注意培养操作的方法是保证HEK293细胞生长和稳定性的基础。这些注意事项,对于保证HEK293...
4.在单克隆细胞筛选方面,cho细胞单克隆细胞株筛选技术相对成熟,市售多款针对悬浮单克隆筛选培养基。hek293细胞相关技术发展较晚,hek293细胞多采用贴壁细胞进行稳定转染及单克隆筛选,后经过悬浮驯化,用于蛋白稳定表达。此方法涉及到细胞消化及单克隆驯化,步骤繁琐且耗费时间,不利用hek293细胞的商业化应用。目前没有针对he...
本发明的无血清无蛋白培养基根据细胞体外生长的营养需求选择不同营养物质以替代动物血清所发挥的作用,并对不同营养物质的比例进行了合理调整,通过进一步添加抗剪切力物质和抗结团物质,实现了不需要补充血清也可以维持高密度悬浮培养HEK293细胞,并维持细胞的正常形态,使细胞分散不结团,同时保持正常的生长速度,利于目的...
1. 一种人胚胎肾293(hek293)细胞,所述hek293细胞的保藏编号为:cctcc no:c2023253。 2.根据权利要求1所述的hek293细胞,所述细胞适应无血清和/或悬浮培养。 3.一种用于生产病毒的方法,包括将病毒载体导入权利要求1所述的hek293细胞。 4.根据权利要求3所述的方法,所述病毒为载体病毒。 5.根据权利要求4所述的...
实施例1用于hek293悬浮培养的全化学成分细胞培养基及培养方法[0041]一、培养基的配制[0042]1、准备配制培养基所需药品/试剂。[0043]2、玻璃瓶的灭菌。[0044]3、滤器的灭菌[0045]囊式滤器:冲洗囊式滤器,正反冲洗各15min,按顺序安装,进出气口螺丝拧松,包好锡箔纸,将滤器包好锡箔纸,管子连接处用扎带扎好,进液...
将HEK293细胞接种于权利要求1所述培养基中; 对所述HEK293细胞进行悬浮培养。 3.权利要求1所述培养基在制备蛋白或者扩增病毒中的应用。 4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述蛋白选自抗体,所述病毒选自腺病毒或慢病毒。 5.一种制备蛋白的方法,其特征在于,包括: ...