HCN 4序列完全相同;构建的目的基因质粒转染293细胞和原代猪骨髓间充质干细胞后,均发现有强烈的绿色荧光出现.(2)构建的慢病毒包装质粒混合物转染293细胞后,发现有强烈的绿色荧光出现,细胞感染率达90%以上.结论 (1)成功将全长HCN 4目的基因片段从pCDNA3-HCN 4质粒卸载下来,成功构建穿梭质粒pCDH1-MCS1-EF1-copGFP...
摘要 本发明公开了一种pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)从心肌组织中提取总RNA,将提取的总RNA反转录合成cDNA第一链,以反转录得到的cDNA为模板,使用含有核苷酸序列为SEQNo:2和为SEQNo:3的基因特异性引物通过PCR扩增得到HCN4起搏基因;(2)抽提pCDH1-MCS1-EF1-cop...
HCN 4序列完全相同;构建的目的基因质粒转染293细胞和原代猪骨髓间充质干细胞后,均发现有强烈的绿色荧光出现.(2)构建的慢病毒包装质粒混合物转染293细胞后,发现有强烈的绿色荧光出现,细胞感染率达90%以上.结论 (1)成功将全长HCN 4目的基因片段从pCDNA3-HCN 4质粒卸载下来,成功构建穿梭质粒pCDH1-MCS1-EF1-copGFP...
HCN 4序列完全相同;构建的目的基因质粒转染293细胞和原代猪骨髓间充质干细胞后,均发现有强烈的绿色荧光出现.(2)构建的慢病毒包装质粒混合物转染293细胞后,发现有强烈的绿色荧光出现,细胞感染率达90%以上.结论 (1)成功将全长HCN 4目的基因片段从pCDNA3-HCN 4质粒卸载下来,成功构建穿梭质粒pCDH1-MCS1-EF1-copGFP...
pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法周亚峰杨向军李红霞韩莲花蒋文平
本发明公开了一种pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)从心肌组织中提取总RNA,将提取的总RNA反转录合成cDNA第一链,以反转录得到的cDNA为模板,使用含有核苷酸序列为SEQNo:2和为SEQNo:3的基因特异性引物通过PCR扩增得到HCN4起搏基因;(2)抽提pCDH1-MCS1-EF1-copGFP...
HCN4 pace-making gene; (2) extracting pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4 plasmid; and respectively carrying out double-enzyme cleavage on an empty plasmid carrier pCDH1-MCS1-EF1-copGFP and EcoRI and BamHI for HCN4 pace-making gene obtained by PCR amplification in the step (1); and (3) ...