HaloTag标记蛋白质的原理是基于融合蛋白标签和合成荧光配基之间共价键的形成,可用于标记细胞或其他生化环境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag报告基因蛋白是33kDa的单体蛋白,是一种经基因工程改造、无催化活性的水解酶衍生物,在生理条件下可以快速和 HaloTag荧光配体形成不可逆的共价键从而实现对目的蛋白的...
其基本原理是利用一种特殊的酶——haloalkane dehalogenase(HaloTag酶),通过基于简单的化学反应的方式,将Halotag融合蛋白质与特定化学物质之间实现共价结合。 在Halotag技术中,需要将Halotag融合到目标蛋白质上,这可以通过遗传工程方法实现。将Halotag与目标蛋白质的基因重组到一起,利用真核或原核细胞表达系统来表达...
以HaloTag蛋白与TMR(一种荧光物质)配基共价结合的分子模式为例(见下)说明下蛋白—配基结合原理,HaloTag TMR配基(下图放大部分红色区域为功能区,桔色的为反应连接部位),配基上的苯丙氨酸残基(蓝色)替代了HaloTag蛋白的催化部位(组氨酸),使得之失...
SNAP、Halo标签的原理🔬首先,我们来聊聊SNAP标签。这个标签系统利用了一个特殊的蛋白质片段,叫做SNAP-tag。你可以把这个标签加到任何你感兴趣的蛋白质上,然后通过一些化学手段,把这个标签和特定的染料结合起来。这样一来,你就能在显微镜下看到这个蛋白质的位置和分布了。是不是很酷?类似地,Halo标签也是通过类似的方...
原理其实很简单: 1.构建带有HaloTag和目标蛋白的融合表达载体 2.转染目标细胞,可按需要选择瞬时转染或稳定转染 3.培养细胞至表达产物 4.选择合适的荧光配基或生物素与细胞共同孵育5—60分钟,配基穿越细胞膜和HaloTag形成共价结合,然后洗掉未结合的配基 5.分析研究:比如活细胞荧光成像;或者固定细胞成像;细胞裂解以及...
通过在果蝇头部的胶质腔中打开一个小窗口并用JF669-HaloTag染料标记WHaloCaMP1a,展示了在呈现苹果醋和化学气味刺激时,WHaloCaMP1a荧光强度的显著增加。每次嗅觉刺激后,KCs中的钙离子响应表现出显著的荧光上升,表明WHaloCaMP1a能够灵敏检测...
Halo装置是一种用于脊柱固定和融合的医疗器械。 主要由头环、金属杆和背心等部分组成。头环通过多个固定钉固定在患者的颅骨上,确保稳固连接。金属杆将头环与背心相连,背心则贴合患者身体,通过调整可以达到合适的固定位置。 Halo装置的工作原理是通过对头颈部提供稳定的支撑和固定,限制脊柱的异常活动,从而促进脊柱损伤部...
npm run release --tag=$version发布模式执行主题打包操作,将自动更新主题中的版本号,并使用这个版本标签重新创建FreeCDN清单文件。 github cdn 的使用 cdn 和chrome servicework实践 fork一下源项目自己进行开发 将一些公共的静态资源放在github上,通过cdn引入,博客打开速度就正常了 ...
b. 特别的,如果R是一个函数,则还需要对函数的输入进行有效性检查,可能需要引入range check 3. 也可以支持多个tables,通过把多个tables组合成一个大的tables,然后利用一个tag selector来对应,方法和Plookup里的章节4和5技术类似。