GST pull-down 实验是验证蛋白质间相互作用的关键手段，它借助谷胱甘肽转移酶（GST）标签与谷胱甘肽琼脂糖珠的特异亲和性，来捕获并鉴定与 GST 融合蛋白相结合的靶蛋白。以下详细阐述该实验的步骤与要点。一、前期筹备 （一）试剂与材料 1. 实验组：能表达 GST 融合蛋白的细菌或细胞裂解液，这里面含有待研究的 GST...
Pierce™ His 蛋白相互作用沉降试剂盒 仅供科研使用。不可用于诊断程序。 Pull-down是一种小规模亲和纯化技术,与免疫沉淀反应类似,但其抗体功能被某些其他亲和系统代替。在这种情况下,亲和系统是一种可被谷胱甘肽琼脂糖微珠捕获的 GST 标签蛋白。融合标记蛋白质作为捕获推定连结配偶体(即猎物)的诱饵。在典型的pull-...
2.GST-pull down 1.两盘10cm皿293T,转染靶蛋白质粒(有载体需增加一组) 2.收样如IP裂解,将蛋白裂解液加入适量凝胶中,孵育3-4h 3.蛋白凝胶使用前gst裂解液洗三次,需要定量,保证GST条带信号大于等于GST-Pin1(不超过两倍)。凝胶太少,可以空白凝胶补多一点,防止洗没了...
使用Magarose-GSH磁珠进行 GST Pull-down 实验,操作简单、快捷,具有传统方法无可比拟的优势。 二、产品特性 产品名称 Magarose-GSH 货号 PMAG002 磁珠浓度 25%(v/v)in 20%乙醇 配基及密度 20-30 umol GSH/ml磁珠 介质 6%交联磁性琼脂糖 粒径 20-45μm 配体结合 6-10 mg GST融合蛋白/ml磁珠 保存 2~...
GST pulldown试剂盒是利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。 GST-pulldown主要包括以下三个部分:①利用基因重组技术构建带有GST标签的原核表达...
GST下拉实验原理简介 GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western ...
总体而言,GST pull-down和CoIP实验都是两种比较有效的蛋白互作验证方法,有各自的优势,但也有对应的局限,如果想要拿到一个漂亮并有说服力的实验数据,最好两种实验都能验证一下。 了解更多分子互作技术相关信息(实验流程、报告模板、资料介绍等)VX咨询:potterlee。
辉骏生物公司供应的专业GST pull down试剂盒能够高效调取GST融合蛋白在各类样本中的互作蛋白,His pull down试剂盒能高效调取6His融合蛋白在各类样本中的互作蛋白。强亲和力、适用范围广、操作简单、价格低等优势,帮助不少生物科研人省心省力的达成pull down实验目标。
1、试剂和耗材 一抗:GST、His抗体(钟鼎生物自制) 二抗:羊抗鼠-HRP(钟鼎生物自制) Protein Marker Acr、Bis、Tris SDS TEMED GST Magarose Beads (钟鼎生物自制) 其它试剂均为国产分析纯 2、主要实验仪器 3、GST-Pull down实验 3.1 平衡树脂(GST)