GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western blot分析，即可证实两...
GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,然后在目的蛋白溶液过柱时,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,洗脱结合物后通过western blot分析,即可证实两种蛋白...
实验周期 拉下实验（Pull-down）的优点 1、鉴定的蛋白是直接作用的蛋白，非间接作用的复合体；2、GST标记可把一些难溶蛋白变成可溶蛋白，使实验变得更易操作；3、GSH谷胱甘肽偶联球珠亲和力强，洗脱纯度高。拉下实验（Pull-down）的缺点 1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性，需用其他方...
实验操作程序: 材料及试剂 探针蛋白与GST融合的原核蛋白,裂解的细胞蛋白,或者组织蛋白提取物 细胞蛋白裂解液,洗脱液: PBS及PBS+1%Triton-100 PBS (1L) NaCl: 8g KCl: 0.2g Na2HPO4: 1.44g KH2PO4: 0.24g 加入800ml蒸馏水,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高温高压灭菌!4℃保存备用!
GST Pull Down AssayGST Pull Down(A/BB拉A) 1.转染获取目的蛋白A。 2.转化(BL21),挑单克隆,诱导GST、GST-B蛋白表达,超声裂解。 3.Buffer A洗Ni柱与GST Beads,离心(4℃,1000rpm,1min),弃上清,相应加入A(500ul)、GST(200ul)与GST-B(100ul)裂解液,Buffer A补齐至500ul。 4.置于4℃垂直混悬仪上...
GST pull-down assayGST pull-down实验是一个行之有效的验证的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过,从而证实两种...
文档标签: gstpulldownassay 1GSTpull-downassayGSTpull-down实验是一个行之有效的验证的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结...
区别是pull-down一般是验证 体外 相互作用；免疫共沉淀一般用于检测细胞水平的 体内 相互作用。
最新GSTpulldownassay详细解析.docx,PAGE PAGE # GST pull-down assay GST pull-down实验是一个行之有效的验证的体外试验技术,近年来越来越受到 广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上, 作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”