GST Pull-down实验用于研究蛋白之间的直接或间接相互作用，此外还可以结合色谱串联质谱（LC-MS/MS）筛选已知蛋白的未知互作蛋白。由于实验时需要将蛋白在体外纯化出来，因此这种方法属于体外研究蛋白互作的方法。实验原理 GST Pull-down实验的基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲...
GST,全称为glutathione-S-transferase,即为谷胱甘肽-S-转移酶蛋白,可以与谷胱甘肽(glutathione,GSH)结合,其与CoIP实验都是验证蛋白互作的有效方法。今天就简单介绍下GST pull-down实验,希望能让做相关实验的小伙伴对此有更深入的理解。 一、实验原理 利用重组技术将诱饵蛋白A与GST进行融合,然后将GSH固定于琼脂糖珠,形成...
GST pull down（GST融合蛋白沉降技术）是体外检测蛋白相互作用的常用方法，可验证已知蛋白之间的互作，也可用于筛选与已知蛋白互作的未知蛋白。此方法操作方便，简单易行。一、GST pull down实验原理 GST pull down的主要原理是利用DNA重组技术将已知蛋白与GST融合，而融合蛋白通过GST与固化在载体上的GTH（谷胱甘肽）亲和...
1、GST pull-down基本概念 利用重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过GST与固相化在球珠上的GSH谷胱甘肽结合,从而分离出能与融合蛋白相互作用是的蛋白。GST pull-down 研究对象是蛋白质与蛋白质之间的相互作用。 2、GST pull-down结合原理 GST pull-down利用DNA重组技术将探针蛋白与GST谷胱苷...
把GSH与琼脂糖交联形成GSH琼脂糖珠，就能够将带有GST标签的诱饵蛋白固定，当体系中存在与诱饵蛋白有直接相互作用的靶标蛋白时，它就能够与微珠固相复合物结合而被“拉”下来，也叫GST pull-down实验。它的基本原理是将靶蛋白-GST 融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当一种“诱饵...
GST下拉实验原理简介 GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western ...
GST pull-down技术原理 GST融合蛋白pull-down方法是将诱饵蛋白质和GST标签融合表达，一步纯化后与含有目的蛋白质的溶液进行孵育，利用谷胱甘肽-Sepharose将GST-融合蛋白-目的蛋白复合物沉淀下来，然后进行SDS-PAGE鉴定与诱饵蛋白质相互作用的蛋白质。一般来说，GST融合蛋白pull-down方法用于两个方面：一是鉴定能与已知融合...
1.GST Pull-Down实验的基本原理 GST Pull-Down实验基于亲和层析的原理，利用谷胱甘肽S-转移酶（GST）标签蛋白的特异性结合能力。在实验中，目标蛋白或蛋白复合物被融合到GST标签蛋白上，形成GST融合蛋白。细胞裂解产生的蛋白质混合物与GST融合蛋白相互作用，使目标蛋白与GST结合形成复合物。随后，通过将混合物与固定在...