我们实验室根据说明书对GST包涵体蛋白纯化方法进行了探索,以期获得高效纯化,具有活性的目的蛋白。份有限公司中佳分公司。1.2方法1.2.1盐酸胍裂解方法:重组蛋白的表达1.2.1.1含GST蛋白的质粒PGEX-4T1-Rpfd转入大肠杆菌DH5а感受态细胞中。挑取单菌落在含氨苄青霉素的培养基中培养,37℃摇动培养LB(200r/min)(6～12)h...
包涵体表达纯化探讨GST融合蛋白包涵体纯化的方法.将表达Rpfd与GST融合蛋白的质粒PGEX-4T1-Rpfd转入大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达目的蛋白.通过比较盐酸胍裂解和Novagen蛋白折叠试剂盒预处理,及调整不同类型蛋白复性液,观察上述因素对GST融合蛋白包涵体纯化效果的影响.结果:超声后先去除可溶性表达,再使用20 mmol Tris-HCl和...