--谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)可以促使过氧化氢(H2O2)与还原性谷胱甘肽(GSH)反应生成H2O及氧化性谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示,测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗,则可求出酶的活力. H2O2+2GSH2H2O+GSSG GSH—Px的活力以催化GSH的反应速度来表示,由于这两个底物在没...
组织、线粒体和细胞膜中GSH-PX 活力的测定 一、样本的前处理：1、10%组织匀浆的制备：a、取组织块（0.2-1g）用冰冷的生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入5-10ml的小烧杯内。b、用量筒量取预冷的匀浆介质或生理盐水。匀浆介质或0.86%生理盐水的量应该是组织重量的9倍。用移液管将总量2/3的匀浆...
1.3.7.1血或组织中还原型谷胱甘肽(GSH)测定方法 1.3.7.1.1原理 GSH-和5,5'-二硫对硝基甲酸(DTNB)反应在GSH-Px催化下可生成黄色的5-硫代2-硝基甲酸阴离子,于420nm波长有最吸收峰,测定该离子浓度,即可计算GSH的含量。 1.3.7.1.2仪器和试剂 仪器:可见光分光光度计、酶标仪、低温高速离心机、匀浆器、恒温水浴...
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠GSH-Px,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,GSH-Px浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线...
—— 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)可以促使过氧化氢(H2O2)与还原性谷胱甘肽(GSH)反应生成H2O及氧化性谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示,测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗,则可求出酶的活力。 H2O2+2GSH2H2O+GSSG GSH-Px的活力以催化GSH的反应速度来表示,由于这两个底物在...
酶联免疫吸附测定法（ELISA）的血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）为传统的GSH-Px活性方法提供了一种补充的测量方法。目的是研究与对照组相比，ELISA在类风湿关节炎患者中测量的GSH-Px是否升高。这是一项病例对照研究，从私人诊所招募类风湿性关节炎患者，并从选举角色中随机选择性别和年龄匹配的对照。GSH-Px浓度由...
在实际的检测中,一般会利用底物和辅酶来检测GSH-Px的活性。常用的方法包括直接测定底物消耗法、间接法和光度法。其中,直接测定底物消耗法是通过测定反应体系中底物消耗的速率来判断GSH-Px的活性,间接法是通过测定GSH的浓度变化来间接测定GSH-Px的活性,而光度法则是通过测定反应体系中H2O2浓度的变化来判断GSH-Px的活性...
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GSH-Px(U/L)=(A本底-A测定)/(A本底-A空白)×200 式中：A空白=空白对照的吸光度 A本底=本底对照的吸光度 A测定=待测样品的吸光度 200=1000(ml)/5(min)注：a、[检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力的单位为U/L=mU/ml。b、样品(如组织样本)中谷胱甘肽过氧化物酶活力=[检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力...
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品活性。 样品收集、处理及保存方法 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避开任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000...