为了证明TCF4通过GPX4调控胃癌细胞铁死亡,研究者构建了GPX4基因敲除的胃癌细胞系,并分别在对照细胞与GPX4-KO细胞中过表达TCF4,检测脂质过氧化产物MDA的水平与胃癌细胞的集落形成能力。结果显示,过表达TCF4能够降低胃癌细胞脂质过氧化水平,增强胃癌...
为了进一步验证2-BP和ML349通过靶向GPX4来调节铁蛋白沉积的敏感性,团队生成了GPX4基因敲除的A375细胞,然后将这些细胞皮下注射到裸鼠体内进行异种移植试验。用IKE单独或与2-BP或ML349联合治疗A375 GPX4-KO异种移植肿瘤,为期4周。与之前的研究一致,GPX4-KO...
细胞培养和转染、免疫共沉淀(IP)、免疫组化(IHC)染色、基因敲除(KO)细胞的建立、脂质过氧化物检测、邻位连接分析(PLA)、泛素化分析、质谱分析GPX4泛素化位点、细胞凋亡分析、细胞死亡和活力检测、克隆形成实验、实时定量PCR、亚细胞成分分离、无标签定量蛋白质组分析等,这些实验手段涵盖了从分子层面到动物模型的全面分...
为了证明TCF4通过GPX4调控胃癌细胞铁死亡,研究者构建了GPX4基因敲除的胃癌细胞系,并分别在对照细胞与GPX4-KO细胞中过表达TCF4,检测脂质过氧化产物MDA的水平与胃癌细胞的集落形成能力。结果显示,过表达TCF4能够降低胃癌细胞脂质过氧化水平,增强胃癌细胞集落形成的能力;而在GPX4被敲除的情况下,过表达TCF4对胃癌细胞铁死亡的影...
为了证明TCF4通过GPX4调控胃癌细胞铁死亡,研究者构建了GPX4基因敲除的胃癌细胞系,并分别在对照细胞与GPX4-KO细胞中过表达TCF4,检测脂质过氧化产物MDA的水平与胃癌细胞的集落形成能力。结果显示,过表达TCF4能够降低胃癌细胞脂质过氧化水平,增强胃癌细胞集落形成的能力;而在GPX4被敲除的情况下,过表达TCF4对胃癌细胞铁死亡的...
本研究采用多种方法开展,包括患者样本收集建立肿瘤类器官模型及PDX模型、表达载体的构建、细胞培养和转染、免疫共沉淀(IP)、免疫组化(IHC)染色、基因敲除(KO)细胞的建立、脂质过氧化物检测、邻位连接分析(PLA)、泛素化分析、质谱分析GPX4泛素化位点、细胞凋亡分析、细胞死亡和活力检测、克隆形成实验、实时定量PCR、亚细...
Gpx4-KO 品系全名 C57BL/6Smoc-Gpx4em1Smoc 目录号 NM-KO-233589 品系状态 活体 加入购物车 导出PDF 基因信息 基因名Gpx4 基因曾用名 GPx-4; PHGPx; snGPx; GSHPx-4; mtPHGPx NCBI ID 625249 MGI ID 104767 Ensembl ID ENSMUSG00000075706 Pubmed Gpx4 人类同源基因 GPX4...
相反,在GPD2-KO细胞中,Mito-TEMPO和ferrostatin-1及TEMPO的作用类似,可以完全抑制RSL3诱导的线粒体脂质过氧化(图3Q-S),并显著抑制细胞死亡(图3T-W)。综上所述,这些数据表明GPD2抑制线粒体脂质过氧化,而RSL3在GPD2缺陷细胞中诱导的铁死亡至少部分是由线粒体脂质过氧化引发的。
为进一步验证SeMet是否以GPX4依赖的方式降低DOX诱导的心脏毒性,研究给予雄性野生型以及GPX4hetko小鼠单次高剂量DOX。生存分析表明相对于对照组,GPX4激活剂SeMet预处理组DOX诱导的死亡率显著降低,且这一作用依赖于GPX4的表达(图4e)。为了确定GPX4在维持小鼠心脏组织中脂质代谢内稳态中的作用,研究还进行非靶向脂质组学测定...
摘要: 为探究促凋亡蛋白Bak/Bax对erastin诱导铁死亡的调控机制,以野生型(WT)、Bak/Bax双敲除(Bak/Bax-DKO)、Bax敲除(Bax-KO)和Bak敲除(Bak-KO)的小鼠成纤维细胞(MEFs)为实验对象,利用CCK-8和流式细胞术检测细胞存活率和活性氧(ROS)的生成量,利用试剂盒测定GSH/GSSG水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白...