目的 构建C-磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)基因真核表达质粒,表达C-GPC3蛋白,并通过哺乳动物展示型全人源scFv抗体库筛选GPC3抗体.方法 通过PCR从含有全长GPC3的质粒中扩增C-GPC3基因,将其克隆至p3457-his载体中,构建重组真核表达质粒p3457-C-GPC3,转染293T细胞,对C-GPC3蛋白的表达进行Westem blot鉴定.将...
型抗体库进行抗体的筛选获得的修饰后单链抗体(Single Chain Fragment Variable; scFv)具有更好的特异性和低免疫原性.与单链抗体相比,全长抗体具有稳定性高和半衰期长的特点,其具有Fc段(Fragment Crystallizable)可与含有Fc段的靶细胞结合介导细胞免疫,同时也可激活补体介导的细胞免疫.因此,全长全人源的抗GPC3抗体在...
(GPC3-ND);将表达纯化得到的重组GPC3-ND蛋白作为抗原免疫新西兰雄兔制备抗GPC3N-端结构域的多克隆抗体,并检测多克隆抗体和GPC3蛋白的结合;利用抗GPC3N-端结构域多抗去检测人原发性肝癌的组织切片上GPC3蛋白的表达;以本实验室构建好的全人源噬菌体抗体库为基础,初步筛选出与GPC3N-端结构域特异性结合的单链抗体...
通过SDS-PAGE和Western blot对单链抗体分子质量进行鉴定.抗体对抗原的亲和力常数通过ELISA和SPR实验获得,流式细胞术分析其与细胞膜受体的结合能力.经筛选获得4个单链抗体(1F7,1D7,1D4和1B10)具有良好的靶向性和亲和力,其中1F7单链抗体的亲和力和结合能力最高.本课题抗GPC3单链抗体为双特性抗体和免疫毒素等新一类...
百普赛斯接受了8家机构调研,探讨了公司在细胞与基因治疗领域的布局及发展机会。公司开发的CD19、BCMA、GPC3等重组蛋白和抗独特型抗体产品,在CAR-T产品开发中具有广泛应用前景,可评估产品质量和活性。针对CAR-T治疗中最广泛应用的靶点CD19,公司推出了特异性靶向FMC63scFv