1. 未能按照上述方法收集样本可能会导致由于内源性DPP4活性而出现错误结果。 2. 建议所有标准品、对照品和未知样本都要进行双份检测。应使用每份重复的平均吸光度读数进行数据分析和结果计算。 3. 对于浓度高于6级标准品的样本,建议使用适当的无GLP-1缓冲基质(例如标准零)进行稀释,以获得更准确的结果。 4. 光敏感...
96孔微孔板涂有针对活性GLP-1 (7-36)酰胺N端的单克隆抗体。标准品、对照品和样本被加入到含有测定缓冲液的微孔板孔中。然后,微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上,以700-900转每分钟的速度振荡孵育。第一次孵育完成后,孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。然后加入检测抗体,微孔板再次在设定为700-900转每分钟的微孔板振...
1.一种GLP-1受体激动剂生物活性检测方法,其步骤包括: (a)培养合适的检测用靶细胞株; (b)制备若干个稀释浓度的GLP-1受体激动剂标准品溶液及供试品溶液 (c)取对数生长期细胞菌株,经过处理过程,加入步骤(b)中制备的标准品及供试品溶液,并继续培养; (d)收集上清稀释后,用胰岛素试剂盒检测得到GLP-1受体激动剂...
1类似物的体外活性检测方法.通过对细胞活性,细胞密度,是否避光等检测条件进行优化后,利用该方法检测了利拉鲁肽等4个GLP-1类似物刺激GLP-1R-GFP-HEK293A细胞后所产生的cAMP含量变化,通过cAMP量效曲线计算其半数有效剂量值(concentration for 50% of maximal effect,EC50),对药物的体外活性进行评价.本研究还利用酶...
该方法是在U2OS/GLP‑1R细胞种上加入梯度稀释的GLP‑1样化合物、然后检测并分析。本申请用高内涵对结果进行图像采集、数据输出,确保结果快速分析;用SoftMax(v4.8)软件对高内涵输出数据进行四参数曲线拟合,实验结果有较高准确度。本发明方法能够高效率、高特异、低成本、高稳定性的对GLP‑1样化合物进行活性检定...
活性GLP-1(7-36)特异性酶免试剂盒【预期用途】该高灵敏度ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是专门用来定量检测血清样本中的胰高血糖素样肽-1(7-36)[GLP-1(1-36)]的浓度。哺乳动物中的GLP-1肽链的基本氨基酸序列
摘要 本发明属于生物技术领域,具体涉及GLP‑1类似物生物活性的检测方法,尤其是利拉鲁肽和杜拉鲁肽生物活性的检测方法。本发明通过用细胞培养基稀释细胞HEK293/GLP1R,用含磷酸二酯酶抑制剂的溶液稀释对照品和供试品,再用试剂盒检测刺激后细胞内cAMP水平变化,用多功能酶标仪进行读数测定,最后用统计软件拟合实验数据...
本申请涉及生物医药领域,具体地,本申请涉及一种检测GLP—1、GLP—1类似物或GLP—1融合蛋白生物学活性的方法,所述方法是基于HEK293CRE‑LucGLP1R细胞的荧光素酶报告基因测定法,包括用2%FBS分析培养基稀释所述细胞,种板,孵育1小时后,加入待测样品进行活性检测。
在GLP-1RA药物活性检测中,荧光素酶报告基因系统通常与GLP-1受体(GLP-1R)的报告基因质粒结合使用。这种质粒包含了与GLP-1R基因表达相关的启动子序列,使得当GLP-1R被激活时,可以驱动荧光素酶基因的表达。 具体检测步骤如下: 1,将GLP-1R的报告基因质粒与荧光素酶报告基因质粒共转染到适当的细胞系中,如293细胞。
GLP-1有2种生物活性形式,分别为GLP-1(7-37)和GLP-1 (7-36)酰胺,这两者仅有一个氨基酸序列不同,GLP-1约80%的循环活性来自GLP-1(7-36)酰胺[1,2]。 GLP-1检测原理 GLP-1试剂盒的包被板预包被了第二抗体及非特异性结合位点被封闭。第二抗体可结合...