在一个实施方案中,GLP-1序列编码GLP-1的氨基酸7至37。在另一实施方案中,GLP-1序列是SEQ ID NO:1。在一个实施方案中,GLP-1构建体编码以SEQ ID NO:5所述的氨基酸序列。在一个实施方案中,编码GLP-1构建体的核酸序列是以SEQ ID NO:6来阐述。在又一实施方案中,GLP-1构建体是编码SEQ ID NO:5的密码子优...
肠激酶酶切位点连接肽的序列如Seq ID No.6所示,编码基因的序列如Seq ID No.5所示。 所述融合基因中,C部分为编码GLP-1或其类似物的基因序列,所述的GLP-1或其类似物可选自GLP-1(7-37),GLP-1(8-37),GLP-1(9-37),GLP-1(10-37),GLP-1(11-37),GLP-1(12-37),GLP-1(13-37),GLP-1(14-37...
首先通过PCR方法获得GLP-1序列, 并在引物两端分别设计了HindⅢ和Bam HⅠ酶切位点。上游引物为5'-CGAAGCTTATG ACTGAACCTCAGGTGGGGTGTGT-3', 下游引物为5'-TTAACCTTCCTGAATGGGGTGGATCCCG-3'。PCR后产物和pc DNA3载体通过HindⅢ和Bam HⅠ双酶切后, T4连接酶连接后转化到E.coli DH5α中, 摇菌后提取质粒共...
采用本发明的方法制备的新型GLP-1受体激动剂,其非抗体蛋白支架部分的分子量为12000Da左右,其连接GLP-1受体激动剂后分子量为16000-20000Da,因此形成的融合蛋白分子量较小,可以穿过血脑屏障而发挥神经保护和治疗退行性神经系统疾病的作用。 利用本发明提供的方法对艾塞那肽进行优化,形成的新型GLP-1受体激动剂半衰期可以...
G418抗性基因PCR所需引物序列如 下: [0093] G418‑F:5‑CTATTCGGCTATGACTGGGC‑3(SEQ ID NO:24) [0094] G418‑R:5‑AATATCACGGGTAGCCAACG‑3(SEQ ID NO:25) [0095] 对筛选出的pcDNA3.1‑GLP1R质粒已整合到基因组中的阳性单克隆,提取蛋白,用 Anti‑GLP‑1R抗体(cat#26196‑1‑AP...
引物由上海生工公司合成,具体序列(5′-3′)为GAPDH上游:GCAAGAGAGAGGCCCTCAG,下游:TGTGAG-GGAGATGCTCAGTG;LC3Ⅱ上游:TTATAGAGCGATACAAGGGGGGAG,下游:CGCCGTCTGATTATCTTGATGAG;Atg5上游:CAATCACCAAGACGGAGAG-AAGAAGAG,下游:TGATGTGAAGGAAGTTGTCTGGATAGC;Atg7上游:GATGGTGAACCTCAGCGGATGTATG,下游:CAGCAGCAGGCACT...
PCR评估噬菌体载体片段插入率:使用特异性引物PCR扩增48个单克隆的VHH基因片段,琼脂糖凝胶电泳发现其中4个单克隆未正确插入VHH基因片段。 片段插入率:44/48 × 100% = 91.67% 获得DNA序列后,翻译为氨基酸序列,剔除测序失败、无效、重复的序列,使用MAFFT进行多序列比对后,最终获得38条CDR3区域完全不同的VHH片段。
一种实施方案中,GLP-1模拟体包括式(I): a. (P(n) - L(o) - V(p) - H(q) - CH2(r) - CH3(s))(t), 其中P为至少一个具有生物活性的GLP-1肽、变体或衍生物,L为至 少一个接头序列,其可以是通过使模拟体具有可选取向和结合特性,从 而提供了结构柔性的多肽,V为免疫球蛋白可变区C-末端的...
以逆转录产生的 cDNA为模板, 以 GAPDH为内参, 用荧光定量 PCR ( Mastercycler ep realplex real-time PCR system, Eppendorf, Hamburg, Germany )检测大 鼠各部位目的基因 GLP-1受体表达, 用 2·ΔΔα方法分析目的基因 GLP-1 受体表达变化。 所用 PCR引物如下: ...
编码GLP-1受体激动剂融合体的病毒载体及其在治疗猫科动物代谢疾病中的用途.pdf,本发明提供了用于治疗猫科动物的II型糖尿病的组合物和方法。提供了一种病毒载体,其包括含有编码猫GLP‑1受体激动剂的序列的核酸分子。(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 C