▲单箭头:自噬小体;双箭头:自噬溶酶体; Part.02 双荧光穿梭质粒系统检测 自噬形成时,mRFP-GFP-LC3质粒转移至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色或黄色荧光斑点。 当自噬溶酶体形成后,酸性环境使GFP荧光淬灭,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶...
※GFP-LC3单荧光自噬指示体系: 利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的原理:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。但是绿色斑点增多并不一定代表自噬活性增强,也有可能是...
以下是mRFP-GFP-LC3自噬评判标准: 自噬囊泡膜的形成:正常情况下,细胞内的mRFP-GFP-LC3表达时呈现为一个均匀分布的绿色荧光信号。当自噬过程发生时,mRFP-GFP-LC3会在囊泡膜上形成点状或环状的荧光信号。观察细胞中是否出现这些点状或环状的信号,可以评判自噬囊泡膜的形成。 自噬囊泡膜的积累:正常情况下,自噬囊泡...
自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1(SQSTM1,也称为p62)也可用于检测自噬,p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。 2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 利用绿色荧光...
自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到...
qqq6595291 生物分子 1 请问您能馈赠点mRFP-GFP-LC3质粒吗?我也实验需要,非常感谢! 4楼2019-04-13 21:18 回复 麋啊哇鹿 生物分子 1 你好 请问能惠赠一点质粒吗 8楼2019-10-22 14:44 回复 于娇891216 生物分子 1 请问您现在还有双荧光指示体系吗 9楼2022-06-13 15:34 回复 ...
带有Rat LC3B自噬基因,mRFP红色荧光,GFP绿色荧光,CMV启动子,Kan抗性G418筛选标记。 (1) 此载体为红色、绿色双荧光标记的细胞自噬检测载体。 (2) 细胞自噬定位基因为大鼠的LC3B 基因。 (3) 用GFP-LC3 质粒观察LC3 的分布,由日本科学家首先构建和推广。但是随即他们又对其提出了 ...
亲亲 您好 为您查询到mrfp-gfp-lc3双荧光自噬能在普通免疫荧光显微镜下观察 亲亲 您好 是可以观察的 亲亲 您好显微镜,是一种用来观察肉眼看不见的微观物体的仪器,是人类进入原子时代的标志。显微镜学是用这种仪器研究微观物体和结构的科学。“显微”意味着肉眼不可见,除非借用显微镜观测。显微镜是由...
和单独迫使GFP-LC3的表达方式的事实一致不足以引发autophagy(如下)。 翻译结果3复制译文编辑译文朗读译文返回顶部 符合这一事实迫使表达独自的绿色荧光蛋白 LC3 不足以触发自噬 (见下文)。 翻译结果4复制译文编辑译文朗读译文返回顶部 符合事实的言论,被迫单独的GFP-LC3是不足以触发autophagy(见下文)。
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