以下是mRFP-GFP-LC3自噬评判标准: 自噬囊泡膜的形成:正常情况下,细胞内的mRFP-GFP-LC3表达时呈现为一个均匀分布的绿色荧光信号。当自噬过程发生时,mRFP-GFP-LC3会在囊泡膜上形成点状或环状的荧光信号。观察细胞中是否出现这些点状或环状的信号,可以评判自噬囊泡膜的形成。 自噬囊泡膜的积累:正常情况下,自噬囊泡...
▲单箭头:自噬小体;双箭头:自噬溶酶体; Part.02 双荧光穿梭质粒系统检测 自噬形成时,mRFP-GFP-LC3质粒转移至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色或黄色荧光斑点。 当自噬溶酶体形成后,酸性环境使GFP荧光淬灭,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶...
自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此可利用WB检测LC3-II/I比值的变化以评估自噬的强弱。此外自噬衔接物如sequestosome 1(SQSTM1,也称为p62)也可用于检测自噬,p62蛋白水平的多少与自噬强弱有着反比例关系。 2.3荧光蛋白标记检测 2.3.1 GFP-LC3 利用绿色荧光...
自噬病毒工具,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平。自噬单荧光标记慢病毒 吉满自主研发出单荧光(绿光或红光)标记的自噬指示产品,当细胞内没有自噬发生时,荧光-LC3融合蛋白会均匀地分散在细胞质中,一旦细胞发生自噬活动,荧光-LC3融合蛋白就会聚集并转位到自噬体膜,此时在荧光显微镜下可清晰地观察到...
汉恒独家推出双荧光LC3细胞自噬腺病毒 双荧光指示体系:汉恒生物科技(上海)有限公司已开发出用于产品。 mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。
暴露甘氨酸,这个是LC3-I,胞浆分布。自噬过程中,LC3-I在ATG7和ATG12-ATG5-ATG16L作用下(和泛素修饰过程很像),与磷脂酰乙醇胺共价结合,这个才是LC3-II,结合在自噬体膜上。LC-II由于磷脂酰乙醇胺的修饰,导致电荷的变化,使得迁移率更快,所以SDS-PAGE中显得分子量比LC3-I小。
亲亲 您好 为您查询到mrfp-gfp-lc3双荧光自噬能在普通免疫荧光显微镜下观察 亲亲 您好 是可以观察的 亲亲 您好显微镜,是一种用来观察肉眼看不见的微观物体的仪器,是人类进入原子时代的标志。显微镜学是用这种仪器研究微观物体和结构的科学。“显微”意味着肉眼不可见,除非借用显微镜观测。显微镜是由...
其实,单独的GFP - LC3的表达不足以引发自体吞噬(见下文)是一致的。 翻译结果2复制译文编辑译文朗读译文返回顶部 和单独迫使GFP-LC3的表达方式的事实一致不足以引发autophagy(如下)。 翻译结果3复制译文编辑译文朗读译文返回顶部 符合这一事实迫使表达独自的绿色荧光蛋白 LC3 不足以触发自噬 (见下文)。 翻译结果4复制...
GFP-LC3 单荧光自噬指示体系:利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的原理,开发出GFP-LC3指示技术:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。但是绿色斑点增多并不...