mRFP-GFP-LC3是研究细胞自噬最常用的工具之一,在mRFP-GFP-LC3的基础上汉恒生物研发出了AAV-LC3工具,可实现在体自噬监测。后续还研发出了可定位细胞器的自噬研究工具,其原理是用细胞器-RFP(红光)和LC3-GFP(绿光)分别标记细胞器和自噬小体,实现两者的共定位,例如线粒体定位的RFP(mito-RFP)、高尔基体定...
自噬双荧光标记慢病毒吉满自主研发的双荧光自噬慢病毒,可用于标记及追踪LC3以及自噬流的变化。其中GFP是酸敏感型GFP蛋白,而mRFP是稳定的荧光表达基团,不受外界影响。由于自噬小体进入第二阶段后,与溶酶体进行融合,形成自噬溶酶体。由于自噬溶酶体内的酸性环境,导致PH下降,GFP淬灭,因此,GFP的减弱表明溶酶体与自...
MRFp-GFP-LC3是一种融合蛋白,将MRFp和GFP与LC3融合在一起,可以通过观察细胞内自噬囊泡膜上的MRFp-GFP-LC3信号来定量细胞的自噬活性。 评判标准: 1.自噬囊泡膜的形成:正常情况下,细胞内的MRFp-GFP-LC3表达时呈现为一个均匀分布的绿色荧光信号。当自噬过程发生时,MRFp-GFP-LC3会在囊泡膜上形成点状或环状的荧光...
自噬形成时,mRFP-GFP-LC3质粒转移至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色或黄色荧光斑点。 当自噬溶酶体形成后,酸性环境使GFP荧光淬灭,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光; 表达mRFP-GFP-LC3的小...
mrfp-gfp-lc3 是一种用于检测自噬过程的荧光报告系统,由 mRFP-GFP 融合蛋白和 LC3 蛋白组成。mRFP-GFP 融合蛋白能够反映自噬泡的融合过程,LC3 蛋白则可以作为自噬体的标志物。mrfp-gfp-lc3 自噬评判标准是基于这一荧光报告系统,通过对细胞内 mRFP 和 GFP 信号的动态变化以及 LC3 puncta 的形成来评估自噬的活性和...
实时监测自噬(流)的mRFP-GFP-LC3腺病毒,mRFP用于标记及追踪 LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体, 即由于GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP荧光 发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。这种串联的荧光蛋白表达载体 系统直观清晰的指示了细胞自噬流的水平,是我们自噬研究尤其是 ...
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mRFP-GFP-LC3串联荧光蛋白腺病毒中表达的GFP和mRFP用于标记与追踪LC3,GFP的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体〔由GFP荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光,原理如下图所示〕。 统计方法 我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是...
mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的...