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shRNA在细胞内会自动被加工成为siRNA,从而引发基因沉默或者表达抑制。通过质粒表达siRNAs同样可以抑制特定基因的表达。选用PolIII启动子启动编码shRNA(smallhairpinRNA)的序列。PolIII启动子总是在离启动子一个固定距离的位置开始转录合成RNA,遇到4—5个连续的U即终止,非常精确。当这种带有PolIII启动子和shRNA编码序列的...
你查文献，得到siRNA的序列，交给公司合成，便宜一些，也可以直接买eGFP siRNA。
图5图6图6为红色荧光蛋白的表达中的荧光蛋白也均有表达但是相对于图2图3表达量偏低推测可能是由于接种细胞时出现了操作上的失误没有保证每孔的数目相同图5图6中的细胞数目接种过少但是图5图6中绿色荧光蛋白的表达依旧多于图4因此可以得出结论gfpsirna可以特异性抑制绿色荧光蛋白基因的表达 细胞生物学实验报告 动物...
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方法:设计Polo样激酶1(Plk1)siRNA序列 及相对应的同义突变引物,并利用二次PCR方法扩增Plk1基因,定向克隆到pRex-EGFP-IRES-Hygro载体中,构建 pRex-EGFP-rPlk1-IRES-Hygro表达载体;利用逆转录病毒感染的方法,构建HeLa/GFP-rPlk1稳定细胞系;利用免疫 印迹及激光共聚焦显微镜,验证Plk1siRNA的干扰效果及稳定细胞系的构建...
研究证明EGFP是一种良好的报告基因和挑选标志2,为进一步研究应用最普遍的哺乳动物细胞表达系统奠定了基?1狙芯垦0月FP作为标记基因,构建GFP/RNAi表达载体,用GFP的转染率反映细胞转染率,进一步判定RNAi对目的基因的作用成效,为体外进行RNAi实验提供科学的依据。1材 6、料与方式材料脂质体2000购自Invitrogen公司,pCl载体...
通过 EGFP 融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基 因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可 能性.采用反转录 PCR(RT PC... 阴彦辉,韦光辉,李伟,... 被引量: 0发表: 0年 山羊心脏型脂肪酸结合蛋白cDNA序列克隆及生物信息学分析 通过RT-PCR技术克隆山羊心脏型脂肪酸结合蛋白的cDNA全序列...
现在需要做一个siRNA沉默细胞中GFP实验。siRNA需要根据对应的GFP mRNA来设计，请问这个GFP mRNA的信息应该...