在应用前景上,GFP作为标志基因在基因治疗中具有广泛的应用潜力。通过构建含有GFP基因的载体,并将其导入靶细胞,可以利用GFP发出的荧光快速识别转染阳性细胞。这种方法不仅适用于外周血单个核细胞,还可用于其他类型的细胞筛选。此外,随着基因治疗技术的不断发展,GFP作为标志基因的应用范围也将进一步扩大。结论 本研究成...
增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为可视化报告基因,广泛应用于基因表达调控、蛋白定位及细胞示踪研究。然而,传统转染方法存在效率低、细胞毒性高等问题,限制了其在工业化生产中的应用。因此,优化CHO细胞转染EGFP基因的条件,提高转染效率和细胞存活率,对于基因功能研究和药物筛选具有重要意义。二、研究方法 1.细胞与载体:...
电转染后的细胞能够正常生长,并且在一定时间内能够稳定表达 GFP。通过倒置显微镜和流式细胞仪观察,发现转染效率较高的细胞群体中,GFP 荧光强度较强。三、讨论 (一)电转染参数的优化 本研究通过对电转染参数的优化,提高了 GFP 质粒转染 SGC7901/ADM 细胞的效率。电场强度、脉冲时间和脉冲次数是影响电转染效果的...
1、接种细胞: (1 )细胞悬液浓度调整为1-2 x 105备用,取六孔板置于超净台面上,每孔接种细胞悬液2ml ,培养过夜。 (2 )观察细胞状态:细胞形态均一, 边界清晰,密度达到80%左右的汇合度为最适转染状态。 (3 )将细胞培养板放回培养箱待用。 2、准备gfp-lc3复合物; 1 参照脂质体使用说明书: 6孔板选择转...
GFP是一种用于检测细胞基因表达和蛋白定位的新型报告分子,性质稳定,不需要反应底物即可产生荧光,观察方便,表达强度高,且可以进行活细胞的实时定位观察。构建带有绿色荧光蛋白的缺陷型重组腺病毒Ad-GFP,感染细胞后观察到感染效率在不影响其生物学特性的情况下一周时可达42.5%,提高病毒滴度时可达85%以上。使用GFP的重组腺...
pcDNA3.1-GFP转染细胞实验 【原理】 外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于前两者的效率低且伤害较大,所以现在除了对于一些特殊细胞系,一般的转染方法都利用脂质体。 利用脂质体转染和其他方法一样,...
GFP是一种常用的荧光染料,可以自发地发出绿色荧光。在细胞转染中,GFP常用于标记转染的细胞,以便在倒置荧光显微镜下观察细胞的转染情况。RFP是一种能够发出红色荧光的荧光染料。与GFP相比,RFP的激发波长和发射波长更为接近红色激光,因此在某些实验中可以更好地抵抗背景干扰。DAPI是一种能够与DNA结合的荧光染料,可以...
GFP蛋白自发荧光GFP蛋白不需要任何外源底物或辅助因子,即可在活细胞内自发荧光,方便实时监测。GFP基因表达原理细胞转染定义细胞转染是指将外源基因导入真核细胞中,使其在细胞内表达相应蛋白的技术。转染方法常见的细胞转染方法包括化学法(如脂质体转染)、物理法(如电穿孔法)和生物法(如病毒介导的转染)。转染效率转染效率...
产品名称:转染GFP的人卵巢癌细胞SKOV3-GFP 细胞规格:1-3×10^6细胞量 库存状态:现货 培养液:McCoy's 5A+15%FBS 运输方式:常温顺丰运输和干冰顺丰运输 货期:复苏细胞需要1-2周,冻存细胞的需要3-5天(特殊情况会有说明) 质控:无支原体、无污染、符合标准 研究范围:仅供科研使用 转染GFP的人卵巢癌细胞SKO...
细胞转染GFP质粒并进行表达之后,一般细胞内会有大量的GFP蛋白,可以发出绿色荧光。GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级,因此只要这个结构仍然保持着,就可以发出荧光。由于GFP的beta-barrel结构非常稳定,一些版本的GFP蛋白(如EGFP)甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全...