酶切鉴定可以检测GFP基因是否成功插入新质粒中；PCR扩增可以检测插入的GFP基因大小是否正确；测序可以进一步验证插入的GFP基因序列是否正确。三、实验结果经过上述步骤，成功将GFP基因克隆到新的质粒中，并通过鉴定证明了重组质粒的正确性。接下来可以在实验中进行表达和应用，如在大肠杆菌中表达GFP蛋白，观察其在细胞中的...
(3)检测GFP是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上,可在荧光显微镜下观察GFP的表达,图中绿色荧光蛋白转基因克隆猪的转基因操作中的GFP既是h也是标记基因(4)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到多项现代生物技术,图中⑤⑥⑦的过程属于_,而⑨过程属于(5)有人从未导入GFP基因的重组细胞发育成的早期胚胎...
GFP基因 终止子 显微注射法 标记基因 蛋白质 GFP基因(绿色荧光蛋白基因) 解:(1)基因表达载体的组成为目的基因+启动子+终止子+标记基因,所以用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分,目的基因导入动物受体细胞常用的方法是显微注射法。 (2)GFP基因与目的基因一起构建...
GFP是一种用于检测细胞基因表达和蛋白定位的新型报告分子,性质稳定,不需要反应底物即可产生荧光,观察方便,表达强度高,且可以进行活细胞的实时定位观察。构建带有绿色荧光蛋白的缺陷型重组腺病毒Ad-GFP,感染细胞后观察到感染效率在不影响其生物学特性的情况下一周时可达42.5%,提高病毒滴度时可达85%以上。使用GFP的重组腺...
1、绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达背景知识绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光。它产生荧光无需底物或辅因子。发色团是其蛋白质一级序列固有的。GFP 由3 个外显子组成,长2.6kb;GFP 是由238...
关键词:绿色荧光蛋白 PCR 基因克隆 表达 1.前言 1.1绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) 绿色荧光蛋白是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物 发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光[1]。 1.2 GFP 的结构 GFP中央是一个圆柱形水桶样结构,如图二。长420 nm,宽240 nm,由11...
绿色荧光蛋白基因(GFP被发现以来,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达 及蛋白质位置的理想标记.请根据图表回答下列问题.(1) 已知GFP是从水母的体细胞中提取出的
(3)据图解,可知最终要得到绿色荧光猪,因此GFP是目的基因,由于GFP能合成绿色荧光蛋白,可据此检测GFP是否成功导入细胞,作为标记基因. (4)将重组质粒A导入猪胎儿成纤维细胞时,采用显微注射法. (5)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中涉及到基因工程、核移植和胚胎移植,图中⑤⑥⑦过程属于核移植技术..⑧过程属于动物...
绿色荧光蛋白来源于海洋生物水母,其基因可在异源组织中表达并产生荧光, GFP cDNA 开放阅读框架长度约 714bp ,编码 238 个氨基酸残基,其肽链内部第 65-67 位丝氨酸-脱氢酪氨酸-甘氨酸通过自身环化和氧化形成一个发色基因,在长紫外波长或蓝光照射下发出绿色荧光。 绿色荧光蛋白是常用的报考基因之一。 转染后的细胞可在...
下图为绿色荧光小鼠制备流程图.Gfp是绿色荧光蛋白基因.请分析回答:(1)构建表达载体需要的酶是: .表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp. . .终止子和复制原点等.(2)图中载体上的NEO基因是一种抗生素抗性基因.图中步骤③所用的G418 是一种抗生素.添加G418的目的是