本文将介绍GFP细胞分选的步骤。 一、准备工作 在进行GFP细胞分选之前,需要准备以下实验材料和设备: 1. GFP标记的细胞系:这些细胞需要在其基因组中表达GFP蛋白,通常通过基因工程方法将GFP基因导入细胞中。 2. 细胞培养基:用于细胞的培养和生长。 3. 细胞培养器具:包括培养皿、离心管等。 4. 荧光显微镜:用于观察...
GFP作为一种筛选标记,在现有商品化的真核表达载体中一般位于两处,一是在多克隆位点(MCS)处,目的基因插入MCS后与GFP形成融合表达,即成熟蛋白的N端或C端带有GFP 标签;第二种情况是GFP位于核糖体进入位点(IRES)后,转录成双顺反子,GFP游离表达于细胞质内部。一般而言,GFP作为筛选标记可以通过流式细胞术分选出转染...
先用阴性细胞设置阈值，阳性细胞就是那些荧光强度大于阴性细胞的细胞
·264·StrokeandNervousDiseases,Oct2008,Vo1.15,No.5流式细胞仪分选thyl—GFP—J转基因小鼠皮层及海马神经元余樱任庆国解翠红王伟【摘要】目的获得活体哺乳动物脑内单一纯化的神经元群。方法用RTPCR和激光共聚焦显微镜扫描脑片鉴定thyl—GFP-J转基因小鼠,取2月龄鉴定阳性小鼠皮层和海马组织,应用番木瓜蛋白酶分离系统...
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