根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系。通过SDS-PAGE和Western ...
草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)可引发草鱼出血病导致高死亡率.草鱼吻端成纤维细胞(grass carp snout fibroblast cells, PSF)是GCRV的敏感细胞系.本实验基于Illumina HiSeq技术对草鱼呼肠孤病毒(GCRV-GD108)感染PSF细胞前后的转录组进行测序,分析比较两个样本间的差异基因.测序共获得192, 099, 940条...
摘要: 在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列。该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性。为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达...
种gcrv gd108株病毒及gcrv ‑ gd108ca株病毒的细胞同时可见红色点状荧光及弥漫性绿色荧光,且接种gd108株细胞绿色荧光密度明显高于接种gcrv ‑ gd108ca株的细胞,这说明gd108株经冷适应培养后病毒复制效率明显要低于原始株,且冷适应株免疫原性未发生较大改变,与ii型草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体仍能够产生交叉反应。
根据草鱼呼肠孤病毒广东株GCRV-GD108编码VP5的M5基因的cDNA序列,分别设计合成带特定酶切位点的特异引物,进行PCR扩增;通过酶切与连接,构建2种重组表达载体pET30c-M5和pColdⅡ-M5,分别转化于大肠杆菌并进行诱导表达;对培养基、诱导时间、诱导剂浓度和温度等条件进行优化,确定最适表达体系.通过SDS-PAGE和Western ...
VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护.研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用.%A strain of grass carp reovirus,named GCRV-GD108 was isolated from sickened grass carp with symptoms of haemorrhage ...
草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株重组VP5蛋白核苷三磷酸酶活性免疫原性在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列。该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性。为检测VP5蛋白是否...
本发明公开了II型草鱼呼肠孤病毒冷适应株GCRVGD108ca及其应用,属于鱼类病毒性出血病防治技术领域.本发明冷适应致弱疫苗株GCRVGD108ca对草鱼病毒性出血病具有良好的保护效果,可有效抵御同源或异源的II型草鱼呼肠孤病毒攻击.安全实验表明,GCRVGD108ca株对靶动物安全,超剂量注射草鱼,未引起实验鱼的发病及死亡现象.在...
Putative membrane proteins encoded by GCRV-HZ08/GD108 and GCRV104.Max, L. NibertRoy, Duncan
Structure-based fiber motifs in GCRV-HZ08/GD108 and GCRV104 p56 and p55.Max, L. NibertRoy, Duncan