绕过了传统限制性内切酶克隆技术的障碍——无需连接酶、亚克隆步骤或者花费时间筛选大量的克隆。体验 Gateway 克隆技术。 快速反应——室温下1 小时即可完成克隆反应 结果准确——克隆效率高于 95%,高效提供您所需的克隆 通用技术——可在载体之间轻松穿梭的DNA 材料/插入片段 ...
Invitrogen Gateway 重组克隆通过一个小时的可逆重组反应,无需使用限制酶、连接酶、亚克隆步骤或大量菌落筛选,从而节省了您的时间、成本和精力。优势包括: 95%的克隆效率 在整个克隆过程中保持方向和阅读框 可高效地将单个片段同时克隆到多个载体中 将多个基因片段克隆到单个构建体中的灵活性 ...
减少对限制性内切酶的依赖:Gateway克隆技术不需要使用特定的限制性内切酶来切割载体和插入片段,这大大简化了克隆过程,并减少了由于酶切位点缺失或不合适而导致的克隆失败的可能性。 提高克隆效率和准确性:Gateway克隆利用了λ噬菌体的重组机制,这使得克隆过程更为高效和准确。与传统的限制性克隆相比,Gateway克隆可以显著降...
Gateway克隆也能在同一管中完成BP和LR克隆反应,加速了attB-PCR产物直接克隆入destination载体的过程,其克隆过程简单,不需要限制酶切、连接或gel纯化步骤。 可进行多片段克隆:可以使用Gateway克隆在一个管内一次性在许多载体上插入多个DNA片段,可以特定的顺序和方向克隆多达4个DNA片段到Gateway载体上,产生expression克隆。这...
Gateway 克隆技术基于 λ 噬菌体的位点特异性重组系统，主要涉及 att 位点之间的重组反应，实现目的基因在不同载体间的高效转移，其原理如下：相关位点与酶 att 位点：包括 attB、attP、attL 和 attR 等位点。attB 位点存在于目的基因两端，attP 位点位于供体载体（如入门载体）上，attL 和 attR 位点则是在重组...
Gateway克隆是一种基于λ噬菌体位点特异性重组系统的高效、通用DNA克隆技术。它允许基因在不同载体间便捷地转移,广泛应用于分子生物学实验和基因工程领域。 2. Gateway克隆的基本原理 Gateway克隆技术依赖于λ噬菌体感染细菌时发生的整合和切割重组反应。在体内,这些反应由噬菌体和细菌上的重组位点attP和attB促进。Gateway...
Gateway克隆技术是一种快速,高效地构建基因表达载体的方法,是基于λ噬菌体可以和大肠杆菌DNA的特定位点发生互换的特点设计的。Gateway克隆技术依赖于BP反应和LR反应,通过BP反应将目的基因连接到质粒1上,获得克隆质粒2,再通过LR反应将目的基因连接到载体质粒3上,获得表达载体,如图所示。请回答下列问题: (1)为构建基因表...
Gateway技术是一种基于重组酶介导的克隆方法,它为基因的快速构建和转化提供了强有力的工具。这种技术的核心在于利用重组酶系统来实现基因片段的无缝连接,从而在不依赖限制性内切酶的情况下进行高效的基因克隆。🔍 Gateway技术的工作原理 Gateway技术通过将目的基因与载体的特定序列结合,形成一种适用于各种表达系统的克隆工...
gateway基因克隆原理 Gateway基因克隆技术是一种高效、通用的DNA克隆方法,可实现基因在不同载体间的便捷转移, 其原理基于λ噬菌体的位点特异性重组系统,主要涉及att位点、重组酶和辅助因子等关键元件,具体如下: 关键元件。 att位点:在λ 噬菌体和大肠杆菌基因组中存在特定的DNA序列,分别为attP(噬菌体上)和attB(细菌...
Gateway克隆技术的核心原理基于λ噬菌体的位点特异性重组系统,通过重组酶介导DNA片段在不同载体间的定向转移。该技术利用BP和LR两种重组酶分别催化Entry载体与中间载体、中间载体与Destination载体之间的重组反应,实现DNA片段的高效克隆,同时避免了传统克隆方法对限制性内切酶的依赖。 一、重组...