GAPDH分子量约为36 kDa。 在进行Western Blot实验时,GAPDH常被用作内参蛋白的选择,用来校正样品之间的蛋白负荷差异。通过对GAPDH的检测,可以确定蛋白表达的相对水平,并将其与其他目标蛋白的表达进行比较。 要探究特定蛋白在不同条件下的表达变化,首先需要提取细胞或组织中的总蛋白,并经过电泳分离。然后,将蛋白转移到...
GAPDH,Tubulin,Actin是WB实验中最常用的三种上样内参(loading control),因被认为表达水平受环境因素影响较小,在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达或变化很小,所以被称为管家基因(house-keeping genes),是WB实验中校正上样量、检测上样过程中存在实验误差,保证实验结果准确性必不可少的。 然而三者之...
对于GAPDH,其分子量大约在36-40 kDa之间。 常用的测定分子量的方法有SDS-PAGE和蛋白质标记。SDS-PAGE是一种常用的蛋白质分离方法,通过电泳将蛋白质按照分子量大小进行分离。在SDS-PAGE中,GAPDH可以通过与已知分子量的蛋白质标记进行比较来确定其分子量。 4. GAPDH作为内参蛋白 在WB实验中,内参蛋白用于校正样本间的...
GAPDHGAPDH是在细胞代谢糖酵解中起关键作用的酶,分子量36kDa,通常表达量较高,在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的,且很少受外部诱导物的影响。然而,在某些特定条件下,比如缺氧和糖尿病等疾病存在时,其表达可能会发生变化,因此在这些情况下不推荐作为内参。Actin Actin(最常用β-actin)是构成细胞骨架的主要蛋白...
GAPDH分子量越高,细胞的能量代谢和甘氨酸代谢率就越高。在高等动物中,GAPDH分子量高于36KDA,这表明GAPDH可以有效地调节细胞能量代谢和甘氨酸代谢,这对细胞的功能是非常重要的。 此外,GAPDH分子量也可以用于判断一个细胞质量的好坏。GAPDH分子量越高,表明细胞质量越好,而GAPDH分子量低则表明该细胞质量较差。GAPDH分子量...
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的...
选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要,首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa,因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说,国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足,但是进口品牌如Abcam、Millipore、CST等价格偏高,一般在¥3000/100ul左右。下面我们为您推荐三款GAPDH*抗体。Abbkine的Anti...
首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于GAPDH的检测分子量大约在36kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的WB实验中。另外,不同的组织来源的样本在选择内参时还有一定的区别。比如...