综上所述,Beta-actin在使用时一定要先进行预实验,从稀释比例和总蛋白上样质量分别验证,才能继续实验。 GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, GAPDH) 是糖酵解过程中的一个关键酶,“恒定高表达”使 GAPDH 在 Western 和 PCR 中常作为内参使用。但事实上,所有生物体的细胞都需要...
今天我就跟大家一起探讨一下两大内参 Beta-actin 和 GAPDH 使用的局限性。 Beta-actin: 脊椎动物 actin 分为 α、β和γ 三种类型,α 型主要表达于心肌和横纹肌细胞中,β及γ 型主要表达于非肌细胞中 (这句来自百度百科)。那么 Beta-actin 的局限性具体体现在哪里呢?Angela Dittmer 等人通过使用不同抗体...
一、大部分的基因都有beta-action基因和GAPDH基因,很多Affymetrix芯片都将它们设为一组观察RNA降解程度的内参基因。mRNA是按照5’至3’的顺序来降解的,通过比较它们3’相对于中间或者3’相对于5’的信号强度,可以很好地指示出试验质量。 二、beta-action基因对应的探针组: AFFX-HSAC07/X00351_3_at AFFX-HSAC07...
综上所述,Beta-actin在使用时一定要先进行预实验,从稀释比例和总蛋白上样质量分别验证,才能继续实验。 GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, GAPDH) 是糖酵解过程中的一个关键酶,“恒定高表达”使 GAPDH 在 Western 和 PCR 中常作为内参使用。但事实上,所有生物体的细胞都需要...