GAPDH分子量约为36 kDa。 在进行Western Blot实验时,GAPDH常被用作内参蛋白的选择,用来校正样品之间的蛋白负荷差异。通过对GAPDH的检测,可以确定蛋白表达的相对水平,并将其与其他目标蛋白的表达进行比较。 要探究特定蛋白在不同条件下的表达变化,首先需要提取细胞或组织中的总蛋白,并经过电泳分离。然后,将蛋白转移到...
western 内参用的GAPDH分子量为146KD，检测条带大约在36kD，B-actin分子量为42KD。严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，这对实验结果分析是非常有用。要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高...
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KDa以上。比如检测目的蛋白分子量为45KDa,此时不适宜选择β-actin(42KDa)作为内参,可以考虑选择GAPDH(36KDa)作为内参。 不同种属的样本内参蛋白不同。 如哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH;植物...
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。比如检测目的蛋白分子量为45KD,此时不适宜选择β-actin(42KD)作为内参,可以考虑选择GAPDH(36KD)作为内参。 ✦ 目的蛋白表达部位 就一般的蛋白检测来说,β-actin、β-Tubulin抗体等就可以了,而针对于核蛋白的定量,...
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KDa以上。比如检测目的蛋白分子量为45KDa,此时不适宜选择β-actin(42KDa)作为内参,可以考虑选择GAPDH(36KDa)作为内参。 二、种属 不同种属的样本内参蛋白不同。