folin-酚法的原理是在碱性条件下,氧化剂氧化蛋白质中的苯丙氨酸和酪氨酸,生成了一系列深蓝色的产物。这些产物能吸收特定波长的可见光,因此可以通过测定吸光度值来计算蛋白质含量。以下是详细的原理过程。 1.氧化剂的作用 氧化剂是folin-酚法的核心组成部分,主要包括铜离子、乙二胺四乙酸和酚酞。这些氧化剂对蛋白质...
下面将介绍Folin酚法的原理。 1. Folin试剂的组成 Folin试剂的主要成分是重铬酸钾和碱性碳酸钠。在碳酸钠的作用下,重铬酸钾被还原成三价铬离子。 2. 蛋白质测定的原理 蛋白质含有大量的酪氨酸、色氨酸和其他含硫氨基酸,它们在强碱性条件下能够被氧化为对应的酸体(例如酚与醛等),这些酸体可以与Folin试剂产生还原...
Folin-酚试剂法（福林-酚试剂法）结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应，其中包括两步反应：第一步是在碱性条件下，与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将磷钼酸和磷钨酸试剂（Folin试剂）还原，生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物，颜色深浅与蛋白含量成正相关。在650nm比色测定的灵敏度比双...
解析 答:蛋白质分子中含有带酚基的酪氨酸 (tyros ine),在碱性条件下其肽链与 Cu2+螯合,形成 蛋白质 -铜复合物,此复合物中酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸 -磷钨酸还原,生成蓝色化合 物,蓝色深浅与蛋白质含量成正比。 利用蓝色深浅与蛋白质浓度成正比的关系可绘制标准曲 线或用公式,求得样品中蛋白质含量。
[参考答案]此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色...
Folin-酚法测定蛋白质含量的原理主要基于两个步骤的化学反应: 双缩脲反应:在碱性条件下,蛋白质分子中的肽键(-CO-NH-)与铜离子(Cu2+)发生反应,形成紫红色的蛋白质-铜络合物。这个络合物在540nm处的吸光度与蛋白质的含量在一定范围内(如5～120g/L)有良好的线性关系。 酚试剂反应:生成的蛋白质-铜络合物中的酪...
Folin-酚试剂法,也称检测法,最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤,以往在生物化学领域中广泛应用。 1.Lowry法原理 Lowry 法的显色原理是根据双缩脲反应,蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物。Folin-酚试剂在Cu+的催化下,磷钼酸磷钨酸盐被蛋白质中的芳香族氨基酸残基还原,产生深蓝色...
Folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐在蛋白质的酪氨酸和色氨酸残基作用下还原，生成深蓝色物质。该物质的蓝色深度与蛋白质含量成正比，与双缩脲方法原理类似，但Folin-酚试剂的加入增强了显色量，提高了蛋白质检测的灵敏度。值得注意的是，进行测定前需小心加入Folin-酚试剂，因为它仅在酸性pH下稳定，但...
对于Folin-酚法测定蛋白酶活力，其原理是蛋白酶能水解酪蛋白产生酪氨酸(Tyr)。在碱性条件下，酪氨酸与Folin试剂反应生成蓝色物质。为了测定酶活力，可通过在680nm波长下比色测定吸光值来计算。为了绘制酪氨酸标准曲线，上述两个步骤是显色反应的关键。Folin-酚法测定蛋白酶活力的过程中，显色反应是关键...