Folin-酚法测定蛋白质含量原理 磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍.试剂 一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠。1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两...
Folin-酚试剂法(福林-酚试剂法)结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应,其中包括两步反应:第一步是在碱性条件下,与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸和磷钨酸试剂(Folin试剂)还原,生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝色混合物,颜色深浅与蛋白含量成正相关。在650nm比色测定的灵敏度比双...
Folin-酚法测定蛋白质含量是一种灵敏的方法,最早由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤。这种方法的显色原理与双缩脲法相同,只是加入了第二种试剂,即Folin-酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。 在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。Folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被蛋白质中的...
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色...
一、 目的 掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。 二、原理 Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合
FOLIN-酚试剂法测定蛋白质含量(LOWRY基本法)❖利用蓝色深浅与蛋白质浓度的关系,可制备标准曲线,测定样品中蛋白质含量。本法可测定的蛋白质含量为15-280g/mL。三操作步骤㈠标准曲线制作 ❖⒈取试管6支,编号。按表7-2操作,加入牛血清白蛋白标准溶液(200g/mL),补足蒸馏水,使各管容量达1mL。算出各管...
蛋白质分子中酪氨酸可以和色氨酸残基(酚基)还原酚试剂(磷钨酸-磷钼酸)起 蓝色反应,此法由folin在1921年开创。 1951年,Lowry对此法进行了改进,先于标本中加碱性铜试剂,再与酚试剂反应, 提高了灵敏度。 第一步:双缩脲反应 在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2能)与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物。即...
由于蛋白质的量与Folin试剂呈正比,因此可以通过比色法测定蛋白质含量。 步骤: 1.准备一系列浓度的标准蛋白质溶液(从低到高),并设置空白对照。 2.取一定量的Folin试剂和样品混合,充分摇匀后静置2-3分钟。 3.用酚试剂对样品进行稀释,制备出一系列浓度的标准样品。 4.对比观察各标准样品的颜色变化,找到蛋白质浓度...
此方法的基本原理是酚类物质在碱性条件下与蛋白质反应,生成一种深蓝色的复合物,该复合物在760nm处的吸光度与蛋白质浓度成正比,因此可以通过测定吸光度来计算蛋白质浓度。以下是Folin-酚法测定蛋白质含量的详细步骤: 一、实验准备 1.实验材料: o待测样品(蛋白质溶液) oNa2CO3 oNaHCO3 o硫酸铜 o酒石酸钾钠 o...