flag基因序列 《flag基因序列》是指一种具有特定功能的基因,可以在细胞表面的膜上显示出一个特定的标志,这个标志被称为flag标志。flag标志可以用于各种生物学研究和应用,例如细胞分离、蛋白质纯化、药物筛选等。 flag基因序列一般被插入到目标基因的N端或C端,使其与目标蛋白质结合,从而在细胞表面表达出flag标志。flag...
高中生物 原癌基因和抑癌基因的功能 原癌基因负责调节细胞周期、控制细胞生长和分裂的过程。原癌基因存在于正常细胞,不仅无害,而且对维持正常身体功能调控细胞生 基因会选择性表达基因有思想吗 没有。 生物体在个体发育的不同时期、不同部位,通过基因水平、转录水平等的调控,表达基因组中不同的部分,其结果是完成细...
故我们可以用LIC方法,将Flag标签直接连接到目的基因序列上,表达后再利用Flag标签对产物进行纯化,然后使用肠激酶切割去除Flag标签,以得到天然蛋白,并对其性质和功能进行研究。 (2)凝血酶:也是一种应用很广泛的蛋白酶,主要特点是经凝血酶切割后的重组蛋白在切割位点的C端会保留两个氨基酸残基。凝血酶可识别两种类型的氨...
Hosfield等利用不依赖连接的克隆(ligation independentcloning,LIC)方法,引入一个氨基酸残基到Flag标签和目的基因之间,形成-DYKDDDDK-X-R序列(X代表引入的残基,R代表目的基因),并将钙调蛋白(calmodulin)基因引入上述序列作为R,以研究残基X对肠激酶切割效率的影响。实验结果表明:位于切割位点旁的氨基酸侧链较长且体积较小...
otI、XhoI、XbaI等,方便插入外源基因。 抗性基因:带有新霉素(Neo)抗性基因,可在真核细胞中用G418进行筛选。 原核抗性:含有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性基因,用于在大肠杆菌中筛选携带p CDNA3.1-flag-N质粒的细胞。 复制子:在潜在感染SV40或表达SV40大T抗原的细胞系中进行染色体外复制。
Flag标签是利用基因工程技术使目标蛋白带上一段特定的氨基酸序列(即DYKDDDDK),形成flag标签与目标蛋白的融合蛋白。由于FLAG标签尺寸小,且具有亲水特性,因此其通常依附于融合蛋白的表面,对融合蛋白的功能、性质影响极小。Flag抗体可以检测位于蛋白N-末端、C-末端或位于融合蛋白内部的Flag标签(DYKDDDDK),被广泛应用于...
如姜茵等[28]利用GST融合基因表达系统表达了幽门螺杆菌Catalase融合蛋白,李志要等[29]利用猪源SUMO3标签蛋白可溶性表达猪腺病毒3型的Hexon基因高变区蛋白。SUMO标签除具有传统融合标签的特性外,还具有分子小、促进折叠、能被SUMO蛋白酶1专一性识别、对热和蛋白酶有很强的抗性、有利于保持目的蛋白的稳定性等优势[30...
Immunoway匠心巨献,鼠、兔重组基因工程抗体,演绎“绝代双骄”。 1 高特异性 YM3808YM3809目标蛋白质的N-或C-端表达,条带清晰明确,单一,无背景,多细胞检测无非特异性结合。 2 超高灵敏度 稀释比例挑战1:20万/80万。 3 高亲和力 IP 1:100...
MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。 纯化:融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结...