Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色;3使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未...
3) 流式细胞仪检测分析时选择合适的电压并调好光补偿,除实验组外建议设置阴性对照(不加Annexin V-FITC 和 PI 标记)用于调节电压,单标对照(只加 Annexin V-FITC,以及只加 PI 的细 胞)用于调节补偿。 4) 绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC 为横坐标,PI 为纵坐标。典型的实验中,细胞可以分成三个...
在流式细胞仪上分析经染色的细胞: 使用流式细胞仪正确分析annexinV-FITC和PI双标的细胞要求仪器的荧光补偿来 。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。 我们建议在实验开始阶段。 1.上样未经染色的细胞,在线性FS-SS点图上显示细胞并。 注意:细胞在经培养后光散射信号会发生变化。要注...
注:a)流式细胞仪检测请取阴性样本(如未经药物处理的活细胞)进行 Annexin V-FITC 和 PI 双染,作为阴性对照;另取阳性样本(如毒性药物处理的细胞)分别进行 Annexin V-FITC 和 PI 单染,作为调节荧光补偿的单阳对照。 b)流式细胞仪检测时 Annexin V-FITC 可用 FITC 通道,PI 优先选 PerCP/Cy5.5 通道,其次是 ...
3) 荧光补偿调节:使用经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 保存条件: 2-8℃避光保存,一年有效。 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动等情况发生变化,也可能随着购买数量不同或所选规格不同而发生变化,如用户与商家线下达成协议,以...
用流式细胞仪检测,Annexin V-FITC(Ex=488nm,Em=530nm)的绿色荧光通过FITC通道(FL1)检测;PI红色荧光(Ex=488nm,Em≥630nm)通过PI通道(FL2或FL3)检测,建议使用FL3。 荧光补偿调节:使用经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 2...
独家搭配阳性质控液,补偿调节不再困难; 针对BD的C6仪器进行优化,方便操作。 结果示例 a.阳性质控液处理的HL60细胞,Annexin V-FITC单染 b.阳性质控液处理的HL60细胞,PI单染 c.未经喜树碱诱导的HL60细胞,Annexin V-FITC/PI双染 d.5 μM喜树碱诱导的HL60细胞,Annexin V-FITC/PI双染 ...
2.荧光补偿调节:使用经凋亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。 8)显微镜分析: 1.滴一滴用Annexin V-FITC/PI双染的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞。 【注】:对于贴壁细胞,可直接用盖玻片培养细胞并诱导细胞凋亡。
处理的细胞样品,作为阴性对照;一组样品做单染,用于调 节补偿。 (2)收集细胞。悬浮细胞:300 g,4℃离心5 min收集细胞; 贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化后300 g,4℃离心5 min 收集细胞,胰酶消化时间不宜过长,以防引起假阳性。 注:细胞用胰蛋白酶消化后,在 培养条件和培养基中恢 复约30 min后染色,避免假阳...
此外,建议设定一组样品做(Annexin V-FITC或PI)单染,用于调节补偿。 收集细胞。 悬浮细胞:300 g,4℃离心 5 min 收集细胞; 贴壁细胞:用不含 EDTA 的胰*消化后 300 g,4℃离心 5 min收集细胞,胰*消化时间不宜过长,以防引起假阳性。【注】:用胰蛋*酶消化然后使细胞在最佳细胞培养条件和培养基中恢复约30 ...