Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了荧...
FITC试剂盒的原理是利用FITC染料与活性蛋白酶底物(如Calcein-AM)结合后的荧光信号来反映细胞的活力。在活力高的细胞中,FITC染料会与底物结合,产生强烈的荧光信号;而在活力低的细胞中,底物无法被FITC染料结合,因此荧光信号较弱。通过测量荧光信号的强度,可以判断细胞的活力水平。 三、PI试剂盒原理 PI试剂盒是一种用于...
1、annexinV-FITC(FL1通道)+PI(FL2通道)双染细胞,FITC阳性+PI阴性细胞百就是早期凋亡。一、原理磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。AnnexinV是一种分子量为3536kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特...
一、检测原理 Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生 凋亡时,膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻到膜表面,而被荧光染料 FITC 标记的 Annexin V 结合,可 通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,而碘化丙啶(Propidium Iodide,...
图1:Annexin V 检测原理 02 实验结果展示 图2:Annexin V-FITC/PI(E-CK-A211)实验结果展示 03实验中需要注意的细节 a. 样本制备方面:(1)贴壁细胞要尽量使用不含EDTA的胰酶进行消化。如果一定要用含EDTA的胰酶,终止消化后,要将细胞洗涤干净,尽量去除EDTA。(2)比较难消化的细胞、组织等样本,可以分...
一、原理 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin V进行荧光素(FITC、PE)或Biotin标记,以标记了的Annexin V作为荧光...
Annexin V-FITC/PI法的原理: 正常细胞(活细胞)具有完好的细胞膜,此时细胞膜的组分之一——磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,当细胞发生凋亡时,细胞膜的结构发生改变,这使得原本在细胞膜内侧的PS外翻到细胞膜的表面,这种现象在凋亡的早期就会出现,因此就可以用与PS具有高亲和力、标记了荧光素的...